Желчно-эскулиновый агар с азидом натрия


Bile Esculin Azide Agar
Желчно-эскулиновый агар с азидом натрия
М493 / M493I

 

Эта среда является селективной и используется для выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков (энтерококков).

Состав**:

Ингредиенты
М493
грамм/литр
М493I
грамм/литр
Гидролизат казеина
17,00
17,00
Пептический перевар животной ткани
–
3,00
Протеозопептон
3,00
–
Дрожжевой экстракт
–
5,00
Мясной экстракт
5,00
–
Oxgall
10,00
10,00
Натрия хлорид
5,00
5,00
Эскулин
1,00
1,00
Железа аммонийного цитрат
0,50
0,50
Натрия азид
0,15
0,15
Агар-агар
15,00
15,00
Конечное значение рН (при 25°С)
7,1 ± 0,2
7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 56,65 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.

Принцип и оценка результата:

Вначале Swan (1) разработал желчно-эскулиновый агар, который в дальнейшем оценивали и модифицировали другие исследователи (2, 3). С небольшими изменениями он рекомендован комитетом ISO (4). Эти среды являются селективными для стрептококков группы Д и обеспечивают их быстрый рост.

Среда высокопитательна, поскольку содержит гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, протеозопептон, дрожжевой экстракт и мясной экстракт. Азид натрия подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов, но позволяет расти фекальным стрептококкам. Гидролиз эскулина и толерантность к желчи позволяют выделять и идентифицировать стрептококкам группы Д в течение 24 ч.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует с голубым оттенком, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М493 (5,67% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2; водный раствор М493I (5,67% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)
Рост
Гидролиз эскулина
Enterococcus faecalis (29212)
Обильный
+
Streptococcus bovis (27960)
Обильный
+
Proteus mirabilis (25933)
Обильный
–
Staphylococcus aureus (25923)
Хороший
–
Streptococcus pyogenes (19615)
Слабый
или отсутствует
–

Примечание:
"+" – почернение среды;
"–" – цвет не изменен

Ссылки:

1. Swan, 1954, J. Clin. Pathol., 7:160.
2. Facklam and Moody, 1970, Appl. Microbiol., 20:245.
3. Isenberg, 1970, Clin. Lab. Forum, July.
4. International Organization for Standardization (ISO), 1984, Draft, ISO/DIS 7899.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.