Основа агара O.P.S.P. для Clostridium perfringens


Perfringens Agar Base (O.P.S.P.)
Основа агара O.P.S.P. для Clostridium perfringens
M579

 

Этот агар с селективными добавками используют в качестве селективной среды для выделения и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Гидролизат казеина
15,00
Папаиновый перевар соевой муки
5,00
Дрожжевой экстракт
5,00
Печеночный экстракт
7,00
Железа аммонийного цитрат
1,00
Натрия гидросульфит
1,00
Трис-буфер
1,50
Агар-агар
15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 25,25 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD011 и 1 флакончика с добавкой FD012. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Агар основан на прописи, разработанной Хэндфордом (1) и используется в качестве селективной среды для выделения и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах (2).

Гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки, дрожжевой и печеночный экстракты обеспечивают среду азотистыми веществами, витаминами группы В и микроэлементами для роста Clostridium perfringens. Гидросульфит натрия и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему на восстановление сульфита Clostridium perfringens, которые образуют черные колонии. Трис придает среде буферные свойства. Селективные свойства среды обусловлены антибиотиками и сульфаниламидом (блеандомицин, полимиксин В и сульфадиазин), которые подавляют рост не относимых к клостридиям сульфитредуцирующих бактерий (сальмонелл, бацилл, протеев, стафилококков и пр.).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий коричневато-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,05% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Цвет колоний
Clostridium perfringens (12924)
Обильный
Черные
Enterococcus faecalis (29212)
Отсутствует
или слабый
Белые, если растут
Clostridium butyricum (9690)
Подавляется
–
Clostridium bifermentans
Подавляется
–
Bacillus subtilis (6633)
Подавляется
–
Proteus vulgaris (13315)
Подавляется
–
Salmonella typhi (6539)
Подавляется
–
Staphylococcus aureus (25923)
Подавляется
–

Ссылки:

1. Handford P.M., 1974, J. Appl. Bact., 37 : 559.
2. Hauschild A.H.W. et al, 1977, ICMSF Methods Studies VIII, Can. J. Microbiol., 23:884.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.