|
|
Всего посетителей: 3850938
|
|
|
Основа дифференциального забуференного угольного агара с дрожжевым экстрактом
Эта среда используется для селективного выделения и дифференциации видов Legionella. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 37,37 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. При необходимости в стерильную среду можно добавить полимиксин В (50 ЕД/мл) и ванкомицин (1 мг/мл). Разлить готовую среду в чашки Петри. Принцип и оценка результата:Первоначально Feeley и соавт. (1) разработали агар FD, который затем был модифицирован Feeley и соавт. (2) для селективного культивирования и дифференциации легионелл. В модифицированной среде крахмал и гидролизат казеина заменены на активированный уголь и дрожжевой экстракт, соответственно, что способствует выделению Legionella pneumophila. Буфер ACES обеспечивает поддержание оптимальных значений рН (3). Эта среда содержит дрожжевой экстракт, который обеспечивает ее питательными веществами. Пирофосфат железа, L-цистеина гидрохлорид и a-кетоглютарат стимулируют рост легионелл (4). Образующиеся в процессе роста токсические вещества нейтрализуются активированным углем, который изменяет поверхностное натяжение среды. Бромкрезоловый пурпурный и бромтимоловый синий служат индикаторами рН в среде (5). Полимиксин В подавляет рост большинства грамотрицательных бактерий, а ванкомицин – грамположительных. Следует отметить, что работа с культурами легионелл должна проводиться в защитных масках, перчатках, с использованием ламинарного бокса и другими предосторожностями. Рабочие поверхности необходимо очищать с применением 5%-ного раствора гипохлорита. Перед очисткой или сбрасыванием все материалы надо подвергать автоклавированию. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий черный порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды:Готовая среда имеет серо-черную окраску, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водный раствор (3,74% вес/об) имеют рН 6,9 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 72-96 ч при 35-37°С.
Ссылки:1. Feeley, et al, 1978, J. Clin. Microbiol., 8:320. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|