|
Motility Sulphide Medium
Среда для тестов на подвижность и сероводород |
M515
|
Эту среду используют для определения у чистых культур подвижности и способности образовывать сероводород.
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Протеозопептон
|
10,00
|
|
Мясной экстракт
|
3,00
|
|
L-Цистин
|
0,20
|
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,20
|
|
Натрия цитрат
|
2,00
|
|
Натрия хлорид
|
5,00
|
|
Желатин
|
80,00
|
|
Агар-агар
|
4,00
|
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2
|
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 10,44 г порошка в 100 мл дистиллированной воды. Прокипятить при постоянном помешивании для полного растворения частиц. Разлить в пробирки по 4 мл. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в вертикальном положении.
Эта среда вначале была предложена Edwards и Bruner (1) и затем модифицирована Hajna (2) для определения у чистых культур подвижности и способности образовывать сероводород.
Протеозопептон и мясной экстракт обеспечивают присутствие важнейших нутриентов (содержат азот, углерод, серу, микроэлементы и др.) для роста бактерий. L-Цистин и цитрат аммонийного железа служат индикатором сероводорода. Агар-агар и желатин обеспечивают целостность линии укола после посева. Неподвижные микроорганизмы растут по ходу укола, подвижные – дают помутнение среды вокруг линии укола. Образование сероводорода сопровождается почернением среды. Иногда сероводородотрицательные микроорганизмы за счет присутствия свободного L-цистина могут давать положительную реакцию. После учета подвижности и образования сероводорода на той же среде можно проверить наличие уреазной активности. Для этого поверх культуры наносят 1 мл Мочевинного бульона (М111А) и инкубируют при 35°С в течение 6 ч. При наличии уреазы бульон становится красно-пурпурного цвета.
Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,4%-ному агаровому гелю.
Среда имеет желтую окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируются столбики геля.
При 25°С водный раствор (10,44% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
|
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Подвижность
|
Сероводород
|
Уреаза
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
+
|
–
|
–
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
+
|
–
|
–
|
|
Proteus mirabilis (25933)*
|
Обильный
|
±
|
+
|
+
|
|
Salmonella typhimurium (14028)
|
Обильный
|
+
|
+
|
–
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
–
|
–
|
–
|
|
Shigella sonnei (25931)
|
Обильный
|
–
|
–
|
–
|
Примечания:
* - подвижность зависит от температуры (подвижен при 20°С, но может быть неподвижным при 35°С)
"+" - положительный результат: подвижен / почернение среды / красновато-лиловое окрашивание.
1. Edwards P. R. and Brunner D. W., 1942, Circulation of the Kentucky Agricultural Experimental Station, No. 54.
2. Hajna A. A., 1950, Public Health Lab., 8:36.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.