Выбор питательных сред и тест-микробов для испытания антибиотиков

Антибиотик
Метод*
Тест-микроб (АТСС)
Питательные среды (NN)

Турбидиметрия
 
Хранение
Инокулят
Метод цилиндров, слой
Нижний
Верхний
Амикацин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
-
-
3
Амфотерицин В
Ц
Saccharomyces cerevisiae (9763)
19
19
19
19
Ампициллин
Ц
Micrococcus luteus (9341)
1
1
11
11
Бацитрацин
Ц
Micrococcus luteus (10240)
1
1
2
1
Блеомицин
Ц
Mycobacterium smegmatis (607)
36
35**
35
36
Кандицидин
Т
Saccharomyces cerevisiae (9763)
19
13
13
Капреомицин
Т
Klebsiella pneumoniae (10031)
1
1
3
Карбенициллин
Ц
Pseudomonas aeruginosa (25619)
1
1
9
10
Цефалексин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Цефалотин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Цефапирин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Цефрадин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Хлорамфеникол
Т
Escherichia coli (10536)
1
1
3
Хлортетрациклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Клиндамицин
Ц
Micrococcus luteus (9341)
1
1
11
11
Клоксациллин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Колистиметат-натрий
Ц
Bordetella bronchiseptica (4617)
1
1
9
10
Колистин
Ц
Bordetella bronchiseptica (4617)
1
1
9
10
Циклосерин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Дактиномицин
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
5
5
Демеклоциклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Диметилхлортетрациклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Диклоксациллин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Дигидрострептомицин
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
5
5
Дигидрострептомицин
Т
Klebsiella pneumoniae (10031)
1
1
3
Доксициклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Эритромицин
Ц
Micrococcus luteus (9341)
1
1
11
11
Гентамицин
Ц
Staphylococcus epidermidis (12228)
1
1
11
11
Грамицидин
Т
Streptococcus faecium (10541)
3
3
3
Канамицин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Канамицин В
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
5
5
Линкомицин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Метациклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Метициллин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Миноциклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Митомицин
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
8
8
Нафциллин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Натамицин
Ц
Saccharomyces cerevisiae (9763)
19
19
19
19
Неомицин
Ц
Staphylococcus epidermidis (12228)
1
1
11
11
Неомицин
Т
Klebsiella pneumoniae (10031)
1
1
39
Нетилмицин
Ц
Staphylococcus epidermidis (12228)
1
1
11
11
Новобиоцин
Ц
Staphylococcus epidermidis (12228)
1
1
2
1
Нистатин
Ц
Saccharomyces cerevisiae (2601)
19
19
19
19
Оксациллин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Окситетрациклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Паромомицин
Ц
Staphylococcus epidermidis (12228)
1
1
11
11
Пенициллин G
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
2
1
Пликамицин
Ц
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
8
8
Полимиксин В
Ц
Bordetella bronchiseptica (4617)
1
1
9
10
Рифампицин
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
2
5
Ролитетрациклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Сизомицин
Ц
Staphylococcus epidermidis (12228)
1
1
11
11
Спектиномицин
Т
Escherichia coli (10536)
1
1
3
Стрептомицин
Т
Klebsiella pneumoniae (10031)
1
1
3
Стрептомицин
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
5
5
Тетрациклин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Тиострептон
Т
Streptococcus faecium (10541)
40
3
41
Тикарциллин
Ц
Pseudomonas aeruginosa (25619)
36
38
38
38
Тобрамицин
Т
Staphylococcus aureus (29737)
1
1
3
Тролеандомицин
Т
Klebsiella pneumoniae (10031)
1
1
3
Тиротрицин
Т
Streptococcus faecium (10541)
3
3
3
Ванкомицин
Ц
Bacillus subtilis (6633)
1
1
8
8
Виомицин
Т
Klebsiella pneumoniae (10031)
1
1
3

Примечания:
* Т – турбидиметрический метод; Ц – метод цилиндров;
** в соответствии с американской Фармакопеей / Национальным Формуляром (1990, USP XXII, NF XVII, U.S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD 20852)

Приготовление инокулята: референс-штаммы хранят на скошенном агаре с пересевом каждые две недели. В день исследования готовят густую суспензию микроорганизмов в стерильном физиологическом растворе. Затем суспензию разводят до определенной концентрации микроорганизмов. Культуры энтерококков (Streptococcus faecium) выращивают в жидкой среде.
Если в качестве референс-штамма используют Bacillus subtilis, культуру можно выращивать на среде N 1 в течение 1 недели или на среде N 6 в течение 4-6 дней, пока не менее 80% клеток (по результатам микроскопии) не перейдет в споровую форму.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок. Одинаков для всех сред!

М003 Среда для испытания антибиотиков N 1 (Посевной, «верхний», агар)
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,05% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Bacillus subtilis (6633)
Хороший
или обильный
Escherichia coli (25922)
Хороший
или обильный
Klebsiella pneumoniae (10031)
Хороший
или обильный
Micrococcus luteus (10240)
Хороший
или обильный
Staphylococcus aureus (29737)
Хороший
или обильный
Staphylococcus epidermidis (12228)
Хороший
или обильный


М005 Среда для испытания антибиотиков N 2 (Основной, «нижний», агар)
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,55% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Bacillus subtilis (6633)
Обильный
Micrococcus luteus (10240)
Обильный
Staphylococcus aureus (29737)
Обильный
Staphylococcus epidermidis (12228)
Обильный


М042 Среда для испытания антибиотиков N 3 (Исследовательский бульон)
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (1,75% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Метод серийных разведений
Escherichia coli (10536)
Обильный
Хлорамфеникол, спектиномицин
Klebsiella pneumoniae (10031)
Обильный
Капреомицин, дигидрострептомицин, стрептомицин, тролеандомицин, виомицин
Streptococcus faecium (10541)
Обильный
Грамицидин, тиострептон, тиротрицин
Staphylococcus aureus (29737)
Обильный
Амикацин, хлортетрациклин, циклосерин, демеклоциклин, диметилхлортетрациклин, доксициклин, канамицин, линкомицин, метациклин, миноциклин, окситетрациклин, ролитетрациклин, тетрациклин, тобрамицин


М140 Среда для испытания антибиотиков N 4
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,65% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 55°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Bacillus stearothermophilus (7953)
Хороший
или обильный


М006 Среда для испытания антибиотиков N 5
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,55% вес/об) имеет рН 7,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Зоны задержки роста
Bacillus subtilis (6633)
Хороший
или обильный
Дактиномицин, дигидрострептомицин, канамицин В, рифампицин


М223 Среда для испытания антибиотиков N 6
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, может иметь легкий преципитат.


Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,0% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 6 суток инкубирования

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Температура
Споры
Bacillus subtilis (6633)
Обильный
35°С
+
Bacillus cereus (10876)
Обильный
30°С
+
Bacillus stearothermophilus (25611)
Обильный
55°С
+


М041 Среда для испытания антибиотиков N 8
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,55% вес/об) имеет рН 5,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зоны задержки роста
Bacillus subtilis (6633)
Хороший
или обильный
Митомицин, ванкомицин
Staphylococcus aureus (29737)
Хороший
или обильный
Пликамицин


М147 Среда для испытания антибиотиков N 9
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 2%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35-37°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Зона задержки роста
Bordetella bronchiseptica (4617)
Обильный
Полимиксин В


М225 Среда для испытания антибиотиков N 10
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,2%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,2% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зоны задержки роста
Pseudomonas aeruginosa (25619)
Обильный
Карбенициллин
Bordetella bronchiseptica (4617)
Обильный
Полимиксин В, колистиметат-натрий, колистин


М004 Среда для испытания антибиотиков N 11
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,05% вес/об) имеет рН 8,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зоны задержки роста
Micrococcus luteus (10240)
Обильный
Ампициллин, эритромицин, клиндамицин, гентамицин
Staphylococcus epidermidis (12228)
Обильный
Паромомицин, неомицин, нетилмицин, сизомицин
Staphylococcus aureus (25923)
Обильный
Канамицин, неомицин
Bacillus pumilus (14884)
Обильный
Канамицин, неомицин, фрамицетин


М280 Среда для испытания антибиотиков N 12
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 2,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачный или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (6,25% вес/об) имеет рН 6,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 25-30°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Saccharomyces cerevisiae (2601)
Обильный


М254 Среда для испытания антибиотиков N 13
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,0% вес/об) имеет рН 5,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-48 ч при 25-30°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Saccharomyces cerevisiae (9763)
Обильный


М101 Среда для испытания антибиотиков N 19
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 2,35%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (6,0% вес/об) имеет рН 6,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Зоны задержки роста
Saccharomyces cerevisiae
(9763)
Обильный
Амфотерицин В, нетамицин
Saccharomyces cerevisiae
(2601)
Обильный
Нистатин


М1141 Среда для испытания антибиотиков N 32
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,08% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зоны задержки роста
Bacillus subtilis (6633)
Хороший
или обильный
Дигидрострептомицин, ванкомицин


М797 Среда для испытания антибиотиков N 34
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,3% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-48 ч при 35°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Mycobacterium smegmatis (607)
Обильный


М798 Среда для испытания антибиотиков N 35
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,7%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,0% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-48 ч при 35°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зона задержки роста
Mycobacterium smegmatis (607)
Обильный
Блеомицин


М290 Среда для испытания антибиотиков N 36
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,0% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Mycobacterium smegmatis (14468)
Обильный


М011 Среда для испытания антибиотиков N 37
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,0% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Escherichia coli (25922)
Обильный
Staphylococcus aureus (29737)
Обильный
Streptococcus pyogenes (19615)
Обильный


М799 Среда для испытания антибиотиков N 38
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,54% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35°

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зона задержки роста
Pseudomonas aeruginosa (29336)
Обильный
Тикарциллин


М1142 Среда для испытания антибиотиков N 39
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (1,75% вес/об) имеет рН 7,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Зона задержки роста
Klebsiella pneumoniae (10031)
Обильный
Неомицин


М1143 Среда для испытания антибиотиков N 40
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,71% вес/об) имеет рН 6,7 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35-37°С

Штамм микроорганизма (АТСС)
Рост
Streptococcus faecium (10541)
Обильный


М1144 Среда для испытания антибиотиков N 41
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,6% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 18-24 ч при 35-37°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Метод серийных разведений
Streptococcus faecium (10541)
Обильный
Тиострептон


Условия и сроки хранения:
Порошки хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовые среды хранить при температуре +2…8°С.