 |
 |
|||||
|
|
|
Всего посетителей: 3835618
|
|
 
|
Пластинки HiDip
Принцип действия: пластинка HiDip – это приспособление для выделения, подсчета и идентификации специфических бактерий в моче, пищевых продуктах и пробах воды. Ее можно использовать также для определения микробной контаминации поверхностей. Пластинки HiDip специально разработаны для микробиологического исследования жидкостей (например, мочи, молока, воды) и поверхностей оборудования и инструментов, используемых в клинике или в пищевой промышленности. Двусторонняя Пластинка HiDip состоит из гибкой пластиковой основы, несущей на своих поверхностях две агаровые среды. В случае комбинации трех питательных сред пластинки HiDip представляют собой трехгранную пластиковую призму, на сторонах которой расположены соответствующие агаровые среды. Выступающая поверхность агара, а также гибкость соединений устройства при этом позволяет делать отпечатки с исследуемых поверхностей. Основа пластинки разделена на 10 зон по 1 см2 каждая, что позволяет рассчитать степень микробной контаминации поверхности на единицу площади. Пластинки HiDip выпускаются с 12 сочетаниями двух или трех агаров (упаковка содержит 5 или 10 контейнеров с пластинками HiDip). Способы примененияПоверхности: Отвинчивают колпачок и достают пластинку HiDip из контейнера, не касаясь агаровых поверхностей. Следует проверить среды на признаки контаминации и усыхания. Прикладывают агар к исследуемой поверхности и прижимают его к ней, согнув приспособление по линии соединения пластинки с колпачком. Следует применять равномерное и достаточное по силе давление на пластинку в течение нескольких секунд. Манипулировать с пластинкой надо осторожно, чтобы агар не остался на исследуемой поверхности. Процедуру повторяют на смежном участке поверхности, используя вторую питательную среду. Затем пластинку возвращают в контейнер и плотно закрывают его. Инкубируют пластинки в вертикальном положении при указанной температуре. Жидкости: Отвинчивают колпачок и достают пластинку HiDip из контейнера, не касаясь агаровых поверхностей. Следует проверить среды на признаки контаминации и усыхания. Погружают пластинку в исследуемую жидкость так, чтобы она покрыла всю поверхность агара (если жидкости не хватает, то ею смачивают всю поверхность агара). Дают жидкости стечь. Затем пластинку возвращают в контейнер и плотно закрывают его. Инкубируют пластинки в вертикальном положении при указанной температуре. На контейнере указывают номер пробы, источник, дату, время и пр. Учет результатов: проводят после извлечения пластинки из контейнера. Сравнивают густоту роста колоний на поверхности агара со специальной схемой. Если уровень контаминации очень высокий (более 107 КОЕ/мл) или жидкость вязкая, рекомендуется приготовить соответствующие разведения материала и исследовать его повторно. Рост 1 колонии (пятна) на агаре можно рассматривать как уровень 102 КОЕ/мл. При отсутствии роста на агаре выдается ответ, что уровень контаминации меньше, чем 102 КОЕ/мл. Хранение и срок годности:Пластинки HiDip хранят при 15° С или при 15-25° С. Срок годности указан на каждой упаковке. Утилизация:С использованными пластинками HiDip надо обращаться с осторожностью, так как на них содержатся живые микроорганизмы. Перед выбрасыванием их автоклавируют или сжигают, однако, если такие возможности отсутствуют, их можно на ночь погрузить (полностью) в дезинфицирующий раствор (например, феноловый).
Среды, используемые в различных комбинациях на пластинках HiDip
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
Штамм микроогранизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Желтые, непрозрачные с более интенсивно окрашенным центром
|
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Обильный
|
Желтые или голубоватые
|
|
Proteus vulgaris (13315)
|
Обильный
|
Голубые
|
|
Salmonella typhi (6539)
|
Обильный
|
Голубоватые
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
Темно-желтые
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
Желтоватые или зеленоватые
|
Агар МакКонки
Среда в качестве дифференциальной рекомендуется для селективного выделения энтеробактерий и близких к ним микроорганизмов. Ее готовят в соответствии рекомендациями американской Фармакопеи. Она содержит кристаллический фиолетовый, хлорид натрия и соли желчных кислот, в результате чего на ней подавляется рост многих грамположительных микроорганизмов, включая стафилококков. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С. Колиформные бактерии образуют розовые или красные колонии, а вокруг колоний Escherichia coli выпадает преципитат.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Красный с лиловым оттенком
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35° С
|
Штамм микроогранизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
Розовые или красные
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Розовые или красные с преципитатом
|
|
Proteus vulgaris (13315)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
|
Salmonella enteritidis (13076)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
|
Salmonella typhi (6539)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
|
Salmonella paratyphi A
|
Обильный
|
Бесцветные
|
|
Salmonella paratyphi B
|
Обильный
|
Бесцветные
|
| Shigella flexneri (12022) |
Средний |
Бесцветные |
| Enterococcus faecalis (29212) | Средний или хороший |
Бесцветные или розовые |
| Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется | – |
Агар с цетримидом
Эта селективная среда используется для выделения Pseudomonas aeruginosa из гноя, мокроты, сточных вод и др. На ней можно определять продукцию флюоресцеина и пиоцианина. Цетримид подавляет рост микроорганизмов, не относимых к Pseudomonas aeruginosa. Через 24-48 ч при 35-37° С на этой среде вырастают колонии Pseudomonas aeruginosa, окрашенные в синий или сине-зеленый цвет.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-янтарный
Ростовые характеристики через 24-48 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Pseudomonas aeruginosa (27853)
|
Обильный
|
|
Pseudomonas maltophila (13637)
|
Подавляется
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
Желчно-эскулиновый агар
Эта среда рекомендована специалистами АРНА для предварительной идентификации стрептококков группы D. Она рекомендована также международным комитетом ISO для выделения и идентификации Yersinia enterocolitica. Некоторые бактерии гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и глюкозы. Последний реагирует с цитатом железа, в результате чего образуется комплекс коричнево-черного цвета. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Желтый
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Гидролиз эскулина
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
+
|
|
Streptococcus faecium (8482)
|
Обильный
|
+
|
|
Yersinia enterocolitica (27729)
|
Обильный
|
+
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Хороший
|
–
|
Примечание:
"+" - почернение среды,
"–" - цвет среды не изменен.
Агар Сабуро с глюкозой
Среду используют для культивирования грибов, в частности тех, которые вызывают инфекции кожи. В соответствии с рекомендациями американской Фармакопеи, ее используют также для определения грибов в ходе санитарно-микробиологических исследований. Ростовые характеристики культур определяют через 48-72 ч инкубирования пластинок при 30° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-янтарный
Ростовые характеристики через 48-72 ч при 30° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Aspergillus niger (16404)
|
Обильный
|
|
Candida albicans (10231)
|
Обильный
|
|
Trichophyton rubrum (28191)
|
Обильный
|
|
Saccharomyces cerevisae (9763)
|
Обильный
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
|
Lactobacillus casei (9595)
|
Обильный
|
Агар МакКонки с MUG (МУГ)
Среду используют для селективного выделения и определения лактозоферментирующих, колиформных, микроорганизмов методом флюоресценции. Обнаружение фермента b -глюкоронидазы позволяет быстро определять Escherichia coli в смешанных культурах. Микробный фермент расщепляет МУГ с образованием 4-метилумбеллифера, который дает сине-зеленое свечение при ультафиолетовом облучении. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Красный с лиловым оттенком
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Флюресценция
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
–
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
+
|
Примечание: флюоресценцию отмечают при УФО с длиной волны 366 нм
Среда HiCrome UTI
Эту дифференциальную среду рекомендуют для определения и идентификации возбудителей мочевых инфекций. На ней облегчается и ускоряется идентификация некоторых грамположительных и грамотрицательных бактерий, ввиду того, что она содержит два хромогенных субстрата, которые по-разному разлагаются родо- и видоспецифическими ферментами бактерий. Ростовые характеристики культур определяют через 24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С. Дальнейшую идентификацию Escherichia coli проводят с помощью теста на индол при использовании реактива DMACA (R035), а идентификацию протеев – с использованием реактива TDA (R036).
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-янтарный
Ростовые характеристики через 24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
TDA
|
DMACA
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Розовые
|
–
|
+
|
|
Proteus mirabilis (10975)
|
Обильный
|
Светло-коричневые
|
+
|
–
|
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Обильный слизистый
|
Голубые
или лиловые |
–
|
–
|
|
Pseudomonas aeruginosa (27853)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
–
|
–
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
Золотисто-желтые
|
–
|
–
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
Голубые мелкие
|
–
|
–
|
Триптон-соевый агар
Среда рекомендуется для культивирования широкого круга микроорганизмов и готовится в соответствии с рекомендациями американской Фармакопеи. Ростовые характеристики культур определяют через 18-48 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-желтый
Ростовые характеристики через 18-48 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Candida albicans (10231)
|
Обильный
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Хороший
или обильный |
|
Bacillus subtilis (6633)
|
Обильный
|
|
Bacteroides vulgatus (8482)
|
Обильный
|
|
Neisseria meningitidis (13090)
|
Обильный
|
Агар с бенгальским розовым для грибов
Эту среду рекомендуют для селективного выделения дрожжевых и плесневых грибов из объектов внешней среды и пищевых материалов. Колони грибов окрашиваются бенгальским розовым, что облегчает их подсчет. Ростовые характеристики культур определяют через 5 дней инкубирования пластинок при 20-25° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Красный
Ростовые характеристики через 5 дней при 20-25° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Aspergillus niger (16404)
|
Хороший
|
|
Candida albicans (10231)
|
Хороший
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Подавляется
|
|
Micrococcus luteus (10240)
|
Подавляется
|
Питательный агар для определения микробного числа (PCA)
Среда рекомендована (APHA, FDA, ISO) для определения микроорганизмов в пищевых продуктах, воде и стоках. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-желтый
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Bacillus subtilis (6633)
|
Обильный
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
|
Lactobacillus casei (9595)
|
Обильный
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
|
Streptococcus pyogenes (19615)
|
Обильный
|
Среда VRBA
Эта селективная среда используется для определения и подсчета колиформных бактерий в воде и пищевых продуктах. Она рекомендована комитетом ISO для подсчета колиформных бактерий. Селективные свойства среды обусловлены присутствием в ней желчных солей и кристаллического фиолетового. Быстро ферментирующие лактозу бактерии формируют на ней красные колонии, окруженные красно-лиловой зоной. Колонии бактерий, не ферментирующих или медленно ферментирующих лактозу, бледные. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Красновато-лиловый
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Розовато-красные с преципитатом
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Обильный
|
Розовые
|
|
Salmonella enteritidis (13076)
|
Обильный
|
Бесцветные
|
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Подавляется
|
–
|
Сульфатная среда API
В соответствии с рекомендациями специалистов Американского нефтяного института (API), среда используется для определения и подсчета сульфатредуцирующих бактерий. Последние превращают сульфат в сульфид, который, реагируя с ионами железа, образует соединение черного цвета. Ростовые характеристики культур определяют через 1 неделю инкубирования пластинок при 30° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-желтый
Ростовые характеристики через 1 неделю при 30° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
|
Desulfovibrio desulfuricans (29577)
|
Хороший или обильный
|
Среда РА
Среду используют для определения колиформных бактерий в питьевой воде после ее обработки и из разводящей сети, молоке и других пищевых продуктах. Она соответствует требованиям американского стандарта (АРНА). Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Лиловый
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Цвет колоний
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Хороший
или обильный |
Желтый
|
|
Enterobacter aerogenes (13048)
|
Хороший
или обильный |
Светло-желтый
|
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Хороший
или обильный |
Желтый
|
|
Salmonella typhimurium (14028)
|
Хороший
или обильный |
–
|
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Подавляется
|
–
|
Сероводородная среда
Эту среду рекомендуют для одновременного определения сальмонелл, вибрионов, цитробактеров и Escherichia coli в воде, молоке и других пищевых продуктах. Наличие роста, с изменением или без изменения цвета среды, свидетельствует о микробной контаминации пробы. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.
Культуральные свойства:
Цвет незасеянной среды (контроль): Голубой
Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С
|
Штамм микроорганизмов (АТСС)
|
Цвет колоний
|
|
Escherichia coli (25922)
|
Голубой
|
|
Vibrio cholerae (15748)
|
Голубовато-лиловый
|
|
Salmonella enteritidis (13076)
|
Голубой
с черным центром |
|
Salmonella typhimurium (14028)
|
Голубой
с черным центром |
|
Citrobacter freundii (8090)
|
Голубой
с черным центром |
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Лиловый
|
Упаковка из 5 пластинок
Пластинка HiDip с тремя средами
Извлекаем контейнер с пластинкой из коробки -> Отвинчиваем крышку и достаем пластинку -> погужаем - или - смачиваем - или - делаем отпечаток -> возвращаем пластинку в контейнер -> инкубируем -> учитываем результаты посева
|
Схема определения концентрации микроорганизмов(КОЕ/мл, КОЕ/см2)
| ||
|---|---|---|
|
бактерий
|
бактерий
|
грибов
|
 |
 |
 |
|
Жидкости
|
Поверхности
|
Жидкости и поверхности
|
Отвинчиваем крышку и достаем пластинку из контейнера -> делаем отпечаток одной средой ... другой ... третьей -> возвращаем пластинку в контейнер и инкубируем
 |
Пластинки HiDip – |
 |