Fluid Thioglycollate Medium Жидкая тиогликолевая среда	M009
Fluid Thioglycollate Medium with Beef Extract Жидкая тиогликолевая среда с мясным экстрактом	М380

 

Эту среду используют для контроля стерильности различных биоматериалов, а также для культивирования широкого круга аэробных и анаэробных бактерий.

Бульон МакКонки М007, М083, М083I, М539 и М796

Рост на среде Fluid Thioglycollate Medium (M009) 1. Candida albicans 2. Clostridium sprogenes 3. Bacteroides vulgatus 4. Bacillus subtilis 5. Контроль (незасеянная среда)

 

Состав**

Ингредиенты	М009 грамм/литр	М380 грамм/литр
Гидролизат казеина	15,00	15,00
Дрожжевой экстракт	5,00	5,00
Мясной экстракт	–	5,00
Глюкоза	5,50	5,50
Натрия хлорид	2,50	2,50
L-цистин	0,50	0,50
Натрия тиогликолят	0,50	0,50
Резазурин	0,001	0,001
Агар-агар	0,75	0,75
Конечное значение рН (при 25°С)	7,1 ± 0,2	7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 29,75 г порошка М009 или 34,75 г порошка М380 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 25°С и оставить для хранения в темном прохладном месте (при температуре ниже 25°С).

Примечание: если более, чем треть среды сверху стала розового цвета, ее можно один раз восстановить, прогрев в кипящей водяной бане или струе пара до исчезновения розовой окраски.

Принцип и оценка результата:

Эту среду предложил Бревер (1) для быстрого культивирования аэробов, а также анаэробов (ввиду добавления редуцирующего вещества и небольшого количества агар-агара). Американские специалисты (2, 3) рекомендовали указанные среды для тестов на стерильность антибиотиков, биоматериала, пищевых продуктов, а также для определения фенолового коэффициента и спороцидных свойств дезинфектантов. Вместе с тем, среды предназначены для исследования прозрачных жидкостей и водорастворимых материалов.

Глюкоза, гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, мясной экстракт и L-цистин дают питательные вещества для размножения бактерий. Тиогликолят натрия снижает окислительно-восстановительный потенциал, а также нейтрализует бактериостатический эффект соединений ртути и других тяжелых металлов, находящихся в исследуемом материале. Любое повышение концентрации кислорода сопровождается изменением цвета специального индикатора редокс-потенциала (резазурина) на красный (4, 5, 6). Низкий редокс-потенциал помогает поддерживать небольшое количество агара в среде (7).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-соломенную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует; не более 10% в ее верхней части может окрашиваться в розовый цвет при хранении.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М009 (2,97% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, раствор М380 (3,47% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
*Bacillus subtilis (6633)	Обильный
*Candida albicans (10231)	Обильный
*Clostridium sporogenes (11437)	Обильный
*Micrococcus luteus (9341)	Обильный
Neisseria meningitidis (13090)	Обильный
Streptococcus pyogenes (19615)	Обильный
*Bacteroides vulgatus (8482)	Средний или хороший

Примечание: * культуру можно инкубировать при 25-30°С в течение 2-7 дней.

Ссылки:

1. Brewer, 1940, J. Am. Med. Assoc., 115:598.
2. U. S. Pharmacopeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
3. Cunniff P. (Ed.), 1995, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed., AOAC, Washington, D.C.
4. Marshall, Gunnison and Luxen, 1940, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 43:672.
5. Nungester, Hood and Warren, 1943, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 52:287.
6. Portwood, 1944, J. Bact., 48:255.
7. MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при комнатной температуре в темноте.