EMB Agar (Levine) Агар Левина	М022
Agar Base Основа агара Левина	М301

 

Эту среду рекомендуют для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной группы.

 

EMB Agar, Levine (M022) Рост Escherichia coli

 

Состав**:

Ингредиенты	М022 грамм/литр	М301 грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	10,00	10,00
Калия гидрофосфат	2,00	2,00
Лактоза	10,00	–
Эозин Y	0,40	0,40
Метиленовый синий	0,065	0,065
Агар-агар	15,00	15,00
Конечное значение рН (при 25°С)	7,1 ± 0,2	7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 37,5 г порошка М022 или 27,5 г порошка М301 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить соответствующий углевод к Основе агара Левина (М301) перед стерилизацией. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Остудить до 50°С и встряхнуть для окисления метиленового синего (чтобы восстановить его синий цвет и размешать хлопьевидный преципитат). Если среда используется в тот же день, ее можно не автоклавировать.

Предупреждение: среду надо хранить в темноте, чтобы не допустить ее окисления на свету.

Принцип и оценка результата:

Эта среда разработана Levine (1, 2) и используется для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации грибов Candida albicans. Американские специалисты рекомендуют эту среду для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной (колиформной) группы (3, 4, 5).

Метиленовый синий и эозин в определенной степени подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Данные красители служат в качестве дифференцирующими индикаторами ферментации лактозы. На этой среде могут вырастать в виде точечных колоний дрожжи и некоторые грамположительные бактерии, например, энтерококки. Weld (6, 7) предложил использовать агар Левина с добавлением хлортетрациклина гидрохлорида для быстрой идентификации грибов Candida albicans в клиническом материале. Обнаружение этих грибов в таком материале, как фекалии, оральный и вагинальный секрет, ногти, чешуйки кожи и другом возможно через 24-48 ч инкубирования при 35-37°С в атмосфере, содержащей 10% углекислого газа. Однако культуральные свойства грибов при этом варьируют.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет красновато-лиловую окраску, опалесцирует с зеленоватым оттенком и легким преципитатом, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М022 (3,75% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, водный раствор М301 (2,75% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний на среде М317
Escherichia coli (25922)	Обильный	Черно-синие с металлическим блеском
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Обильный	Бесцветные
Salmonella typhimurium (14028)	Обильный	Бесцветные
*Candida albicans (10231)	Хороший или обильный	Бесцветные
Enterobacter aerogenes (13048)	Хороший	Розовые или красные
Staphylococcus aureus (25923)	Слабый или отсутствует	Бесцветные
Saccharomyces cerevisiae (9763)	Слабый или отсутствует	Кремовые
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	–

Примечание: "*" в атмосфере с 10% углекислого газа;

Ссылки:

1. Levine M., 1918, J. Infect. Dis., 23:43.
2. Levine M., 1921, Bull. 62, Iowa State College Engr. Exp. Station.
3. Greenberg A. E., Trussell R. R. and Clesceri L. S. (Eds.), 1985, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 16th ed., APHA, Washington, D.C.
4. Marshall R. (Ed.), 1992, ‘Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 16th ed., APHA Inc., New York.
5. Speck M. (Ed.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
6. Weld J. T., 1952, Arch. Dermat. Syph., 66:691.
7. Weld J. T., 1953, Arch. Dermat. Syph., 67(5):433.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С в темноте.