Brilliant Green Bile Agar Желчный агар с бриллиантовым зеленым

M059

 

Данную среду рекомендуют для подсчета колиформных (БГКП) бактерий в воде открытых водоемов и сточных водах.

Состав**:

Ингредиенты	грамм /литр
Пептический перевар животной ткани	8,25
Лактоза	1,90
Натрия сульфит	0,205
Железа хлорид	0,0295
Калия дигидрофосфат	0,0153
Эриоглауцин	0,0649
Фуксин основной	0,0776
Oxgall	0,00295
Бриллиантовый зеленый	0,0000295
Агар-агар	10,15
Конечное значение рН (при 25°С) 6,9 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 20,7 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в пробирки и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для посева проб воды объемом 10 мл рекомендуется готовить среду двойной концентрации.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: основной фуксин является сильным канцерогеном, поэтому с ним надо обращаться осторожно: избегать вдыхания аэрозоля порошка и попадания его на кожу.

Принцип и оценка результата:

Желчный агар с бриллиантовым зеленым впервые был предложен Nobel и Ponney (1) в качестве плотной среды для прямого подсчета колиформных бактерий в ходе санитарно-микробиологического исследования различных материалов. В дальнейшем среда была одобрена для этой цели АРНА (2).

Этот агар содержит в комбинации бриллиантовый зеленый и Oxgall, которые служат высокоселективными компонентами для колиформных бактерий, подавляя рост большинства грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий. Эриоглауцин и основной фуксин являются индикаторами кислотности среды. В нейтральной зоне рН среда имеет синий цвет, а в случае кислотообразования при ферментации лактозы среда окрашивается в розовый цвет и колонии на ней вырастают с цветом от розового до темно-красного (в зависимости от величины сдвига рН). Колонии колиформных бактерий темно-красные с розовым ободком на фоне неизмененной синей среды.

Среду рекомендуется использовать сразу после приготовления, в противном случае ее надо хранить в темноте. Среда чувствительна к действию света, особенно прямого солнечного. В результате светового облучения у нее могут снижаться дифференцирующие свойства, а цвет меняться с голубого на лиловый или красный.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет голубовато-лиловую окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2,07% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	Розовые
Escherichia coli (25922)	Обильный	Темно-красные с зоной преципитата
Salmonella enteritidis (13076)	Обильный	Бесцветные или светло-розовые
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Noble and Ponney, 1935, J. Am. Waterworks Assoc., 27:108.
2. Speck M.L. (Ed.), 1984, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed., APHA, Washington, D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.