Salmonella Differential Agar / Modified (RajHans Medium) Дифференциальный агар Сальмонелла / Среда Радж Ханса	М1078
	М1082

 

 

Эти среды используют для идентификации и дифференциации сальмонелл от других энтеробактерий, в частности, протеев.

Дифференциация сальмонелл на агаре Salmonella Differential Agar (M1078):  Escherichia coli (синие), Salmonella серовара Typhimurium (красные) и Salmonella серовара Typhi (бесцветные)

 

Состав*:

Ингредиенты	М1078  грамм/литр	М1082  грамм/литр
Часть А:
Пептон специальный	8,00	8,00
Дрожжевой экстракт	2,00	3,00
Натрия дезоксихолат	1,00	1,00
Натрия хлорид	–	5,00
Индикатор ВС	2,00	2,00
Агар-агар	12,00	12,00
Часть В:
Пропиленгликоль	10,00	10,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

* Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 10,0 г жидкости «Часть В» в 1000 мл дистиллированной воды. Добавить 25,0 г порошка Части А (М1078) или 31,0 г порошка Части А (М1082). Прокипятить с частым помешиванием для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Остудить до 45-50°С, тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эти среды представляют собой небольшую модификацию исходной прописи, предложенной Rambach (1), используемой для дифференциации сальмонелл от протеев и других энтеробактерий. Такие признаки, как ферментация лактозы и образование сероводорода учитывают на многих средах для идентификации и дифференциации сальмонелл (2), например, на Агаре Сальмонелла-Шигелла, КЛД-агаре и др. Образование кислоты из пропиленгликоля – новое свойство сальмонелл, которое использовано при составлении дифференциальных сред для сальмонелл.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают обильный рост бактерий, тогда как дезоксихолат придает среде селективные свойства в отношении кишечных бактерий, подавляя рост грамположительных микроорганизмов. В присутствии кислоты, образующейся из пропиленгликоля, индикатор ВС становится розовым. Способность ферментировать лактозу определяют с помощью индикатора на фермент b-галактозидазу. Лактозоположительные (обладающие b-галактозидазной активностью) бактерии образуют в присутствии индикатора вещество голубого цвета, которое окрашивает их колонии в такой же цвет (3).

Сальмонеллы образуют кислоту при ферментации пропиленгликоля и после взаимодействия с индикатором рН формируют типичные красные колонии. У других грамотрицательных кишечных бактерий формируются бесцветные колонии. Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis образуют красные колонии.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Часть А:

Гомогенный сыпучий розоватый порошок.

Часть В:

Бесцветная вязкая жидкость.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,2%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-оранжевую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, когда в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы Части А М1078 (2,5% вес/об) или Части А М1082 (3,1% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний
Salmonella enteritidis (13076)	Обильный	Красные
Salmonella typhimurium (14028)	Обильный	Красные
Salmonella typhi (6539)	Обильный	Бесцветные
Escherichia coli (25922)	Обильный	Голубые
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный	Голубые
Proteus mirabilis (25933)	Обильный	Бесцветные
Shigella flexneri (12022)	Обильный	Бесцветные
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Rambach A., (1990), Environ. Microbiol., 56:301.
2. Greenberg A. E., Trussel R. R., Clesceri L. S., (Eds.), (1985), Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 16th ed., APHA, Washington, D.C.
3. Greenwald R., Henderson R.W. and Yappaw S., (1991), J. Clin. Microbiol., 29:2354.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.