M-PA Agar Base Основа М-агара для псевдомонад

M1121

 

Эту среду используют для определения и выделения Pseudomonas aeruginosa мембранным методом.

Состав**:

Ингредиенты	грамм /литр
L-Лизина гидрохлорид	5,00
Натрия хлорид	5,00
Дрожжевой экстракт	2,00
Ксилоза	2,50
Сахароза	1,25
Лактоза	1,25
Железа аммонийного цитрат	0,80
Натрия тиосульфат	6,80
Феноловый красный	0,08
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 39,68 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить (на 1000 мл среды) 176 мг сульфапиридина, 8,5 мг канамицина, 37,0 мг налидиксовой кислоты и 150 мг циклогексимида.

Тщательно перемешать и разлить в необходимом количестве в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда приводится по прописи Levin и Cabelli (1), она рекомендована специалистами АРНА (2) для санитарно-микробиологических исследований воды и стоков методом мембранных фильтров. Методом бродильных проб успешно выделяют Pseudomonas aeruginosa, однако, при исследовании больших объемов воды этот метод не дает точных и воспроизводимых результатов. Проблему можно решить, используя метод мембранных фильтров. Первоначальную пропись среды позже несколько раз меняли разные авторы (2, 3).

L-Лизина гидрохлорид, дрожжевой экстракт и три углевода (лактоза, сазароза и ксилоза) служат источником углерода, азота, серы, минеральных веществ, витаминов и других факторов роста и энергии. Соли обеспечивают важнейшими ионами, а хлорид натрия поддерживает так же осмотическое давление. Феноловый красный является индикатором рН, который в кислой среде становится желтым. Канамицин и налидиксовая кислота подавляют рост грамположительных и грамотрицательных бактерий, соответственно. Канамицин нарушает синтаз белка, а налидиксовая кислота блокирует репликацию ДНК в бактериальной клетке (4). Циклогексимид подавляет рост грибов.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий розовый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет оранжево-красную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (3,97% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 72 ч при 41,5±0,5°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост*	Цвет среды
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Хороший или обильный	Розовый
Escherichia coli (25922)	Подавляется	–
Klebsiella pneumoniae (13883)	Подавляется	–
Salmonella typhi (6539)	Подавляется	–
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–

Примечание: * - после добавления сульфапиридина, канамицина и налидиксовой кислоты

Ссылки:

1. Levin and Cabelli, 1972, Appl. Microbiol., 24:864.
2. Carson, Peterson, Favero, et al, 1975, Appl. Microbiol., 30:935.
3. Dutka and Kwan, 1977, Appl. Microbiol., 33:240.
4. Estevez, 1984, Lab. Med. 15:258.
5. Greenberg A. E., Trussell R. R. and Clesceri L. S. (Eds.), 1995, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 19th ed., APHA, Washington, D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при +2…8°С.