Listeria Oxford Medium Base Основа Оксфордской среды для листерий

M1145

 

Этот бульон со специальной добавкой рекомендуют для селективного выделения видов Listeria из патологического материала. 

Состав**:

Ингредиенты	грамм /литр
Пептон специальный	23,00
Лития хлорид	15,00
Натрия хлорид	15,00
Крахмал кукурузный	1,00
Эскулин	1,00
Железа аммонийного цитрат	0,50
Агар-агар	10,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 27.75 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50⁰С и асептически добавить растворенное в 50%-м этаноле содержимое флакона с селективной добавкой для выделения листерий (FD071). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.

Принцип и оценка результата:

Данная среда основана на прописи, предложенной Curtis и соавт. (1) для выделения Listeria monocytogenes из клинических образцов и образцов пищевых продуктов.

Хлорид лития и антибиотики подавляют рост грамотрицательной микрофлоры и подавляющей части грамположительной флоры (отдельные штаммы Staphylococcus образуют эскулинотрицательные колонии). Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний.

Методика выделения листерий зависит от вида исследуемого материала (2). Для всех образцов рекомендуется селективное и холодовое обогащение (3, 4). Фекалии и другие биоматериалы гомогенизируют в 0,1% пептонной воде (M028) и 0,1 мл полученной взвеси высевают на Оксфордский агар или в бульон для селективного обогащения листерий, инкубируют при 30⁰С в течение 7 дней, после чего высевают на селективную среду.

Для образцов пищевых продуктов и проб из внешней среды обычно используют селективное обогащение.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий темно-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0 % агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет темно-янтарную окраску, с голубым отблеском.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,55 % вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35 °С .

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Гидролиз эскулина
Listeria monocytogenes (19117)	Обильный	+
Listeria monocytogenes (19111)	Обильный	+
Listeria monocytogenes (19112)	Обильный	+
Staphylococcus aureus (25923)	Хороший	—
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	—
Enterococcus hirae (10541)	Подавляется	—
Bacillus subtilis (6633)	Подавляется	—

Ссылки:

1.Curtis G.D.W. et al, 1980, Letters in Appl. Microbiol.,8:95.
2.Van Netten P.et al,1989, Int. J. Food. Microbiol. 6:187.
3.Hayes P.S.,et al, 1986, Appl. Environ. Microbiol.,51:438.
4.Garayzabal J.F. et al 1986, Can. J. Vicrobiol.,32:149.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.