Colonisation Medium w/Dulbecco’s Phosphate Buffer
Среда для энтеротоксигенных эшерихий
M1239

 

Этот бульон используют для приготовления суспензии энтеротоксигенных Escherichia coli, используемой в тесте колонизации культуры ткани НeLa.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Панкреатический перевар желатина
0,20
Пептический перевар животной ткани
0,08
Настой мозга и сердца, сухой
0,08
Манноза
1,00
Глюкоза
0,04
Натрия хлорид
5,67
Натрия гидрофосфат
0,17
Смесь желчных кислот
0,10
Калия хлорид
0,14
Калия дигидрофосфат
0,14
Кальция хлорид
0,07
Марганца хлорид
0,07
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 7,76 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать. Стерилизовать фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Асептично разлить в стерильные пробирки или флаконы.

Принцип и оценка результата:

Эта среда рекомендована специалистами АРНА (1) для приготовления суспензии энтеротоксигенных Escherichia coli, используемой в тесте колонизации культуры ткани НeLa. Энтеротоксигенные штаммы Escherichia coli способны прилипать к эпителиоцитам тонкого кишечника, пролиферировать (колонизировать) и вырабатывать один или несколько токсинов. Специфичность взаимодействия с клетками хозяина обусловлена наличием уникальных факторов колонизации (антигенов и лектинов). Для простоты оценки колонизации предложено использовать несколько типов клеток млекопитающих, в т.ч. линию HeLa.

Панкреатический перевар желатина, пептический перевар животной ткани и настой мозга и сердца являются источником необходимых нутриентов для роста энтеротоксигенных Escherichia coli, например, аминокислот, факторов роста, микроэлементов. Манноза и глюкоза служат источником энергии, фосфат обеспечивает буферные свойства среды.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (7,76% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики штамма через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов
Рост
Escherichia coli (25922)
Обильный

Ссылки:

1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.)., 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +8°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить не рекомедуется.