EC Broth Лактозный бульон ЕС

М127 / М127I

 

Среду рекомендуют для селективного определения и подсчета микроорганизмов вида Escherichia coli (предположительно) бродильным методом.

Состав**:

Ингредиенты	М127 грамм/литр	М127I грамм/литр
Гидролизат казеина	20,00	–
Триптоза	–	20,00
Лактоза	5,00	5,00
Смесь желчных кислот	1,50	1,50
Калия гидрофосфат	4,00	4,00
Калия дигидрофосфат	1,50	1,50
Натрия хлорид	5,00	5,00
Конечное значение рН (при 25°С)	6,9 ± 0,2	6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 37,0 г в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Разлить среду в пробирки с поплавками. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Концентрацию среды выбирают в соответствии с предполагаемым объемом инокулюма.

Принцип и оценка результата:

Эта среда предложена Hajna и Perry (1). Tennant и соавт. (2) сообщили об ее использовании для подсчета Escherichia coli в морской воде и при исследовании моллюсков. Другие авторы (3) использовали ее для определения Escherichia coli в замороженных продуктах и при исследовании ядер орехов. Ее рекомендуют для оценки воды, сточных вод и пищевых продуктов бродильным методом (методом наиболее вероятных чисел)(4, 5). С небольшой модификацией она рекомендована международным комитетом по стандартизации (6).

Триптоза или гидролизат казеина являются источником важнейших питательных веществ. Лактоза – ферментируемый углевод. Соли желчных кислот подавляют рост грамположительных бактерий, особенно бацилл и энтерококков. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды, важные в процессе ферментации лактозы. Образование газа в поплавке в течение 24 ч или менее служит предварительным доказательством присутствия колиформных бактерий. Эту среду можно использовать для инкубирования при 37°С с целью обнаружения колиформных бактерий или при 45,5°С с целью обнаружения Escherichia coli. Учет результатов ведут по схеме:

Газ при температуре инкубирования 45,5°С (и 37°С) – Escherichia coli (и, возможно, другие колиформные бактерии),

Газ только при температуре инкубирования 37°С – колиформные бактерии (кроме Escherichia coli)

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (3,7% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 44,5°С ± 2.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Газ
Escherichia coli (25922)	Обильный	+
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный	+
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Средний или хороший	–
Enterobacter aerogenes (13048)	Подавляется	–
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	–
Bacillus subtilis (6633)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Hajna and Perry, 1943, Am. J. Publ. Health, 33:550.
2. Tennant et al, 1961, Can. J. Microbiol., 1:733.
3. Fishbein and Surkiewicz, 1964, Appl. Microbiol., 12:127.
4. Greenberg A. E., Clesceri L. S. and Eaton A. D. (Eds.), 1992, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 18th ed., APHA, Washington, D.C.
5. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
6. International Organization for Standardization (ISO), 1993, Draft ISO/DIS 7251.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.