Sauton’s Fluid Medium Среда Сотона, жидкая

M1276

 

Эту среду в соответствии с индийской Фармакопеей используют для культивирования и подсчета микобактерий. 

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Железа аммонийного цитрат	0,0167
L-Аспарагин	1,330
Лимонная кислота	0,660
Магния сульфат	0,166
Калия гидрофосфат	0,287
Натрия дигидрофосфат	0,633
Натрия хлорид	0,400
Твин-80	0,833
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 4,32г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 20 мл глицерина. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

В соответствии с индийской Фармакопеей эту среду используют для определения числа КОЕ микобактерий в вакцинах BCG с известной активностью. Метод предполагает растворение лиофильно высушенной вакцины в исходном флаконе прилагаемым растворителем с последующим образованием пула из 5 растворенных таким образом вакцин. Из пула готовят 3 разведения на среде Сотона с таким расчетом, чтобы в 0,2 мл инокулюма содержалось 100, 400 и 20 КОЕ. По 0,2 мл из каждого указанного разведения высевают на поверхность скошенной среды Левенштейна-Йенсена и инкубируют посевы при 37 °С в течение 28 дней. Вакцину считают пригодной, если в 0,1 мл восстановленной вакцины содержится 1-33 (х10⁵) КОЕ.

Соли типа цитрата аммонийного железа и сульфата магния необходимы для роста микобактерий в качестве источника неорганических ионов и азота. Аспарагин добавляют для стимуляции роста микобактерий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий белый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда бесцветна, прозрачна или слегка опалесцирует.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (0,43 % вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штамма через 2 недели при 37 °С (а анаэробных условиях).

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
Mycobacterium smegmatis (14468)	Обильный
Mycobacterium tuberculosis (25177)	Обильный

Ссылки:

1. Atlas R. M. (1993)Handbook of Microbiological Media, Parks L. (E d.), CRC Press, Inc.
2 . Indian Pharmacopoeia, 1996, volume II, the controller of Publications, Delhi, page 109-110.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.