Antimycotic Sensitivity Test Agar
Агар для определения чувствительности к антимикотикам
M1336

 

Рекомендуется для определения чувствительности к антимикотикам диск-диффузионным методом.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Казеина гидролизат ферментативный
19,00
Дрожжевой экстракт
10,00
Глюкоза
20,00
Натрия цитрат
10,00
Натрий фосфорнокислый двузамещенный
1,00
Агар
25,00
ph готовой среды (при 25°С) 6,6 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 85, 00 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 минут. Хорошо перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

МЕТОДИКА

1. Приготовление чашек со средой.
Налить 15 мл готовой среды в 90 мм чашку (толщина слоя агара около 2,4 мм) или 5 мл в чашку диаметром 50 мм. Подсушить чашки со средой 15 минут при 37 °С.

2. Приготовление инокулята:
Снять хорошо изолированные колонии 24-часовой культуры на среде Декстрозный агар Сабуро (Sabouraud Dextrose Agar M063) и суспендировать в стерильном 0,85% растворе NaCl, доводя мутность суспензии до 0,5 единиц МакФарланда.

3. Инокуляция:
Внести на подсушенные чашки приготовленный инокулят: 5 мл – в 90 мм чашку; 2 мл – в 50 мм чашку. Отсосать пипеткой излишнюю жидкость и оставить чашки при комнатной температуре на 15 минут. После этого, используя пинцет, положить диски с антифунгальными препаратами.

4. Инкубация:
Оставить чашки с дисками при комнатной температуре на 30 минут (для предварительной диффузии) и затем инкубировать при 37 °С 24-48 часов.

Контроль качества: 

Препарат (мкг/диск) Рост культуры Размеры зон задержки роста (мм)
    Candida albicans
(ATCC 90028)
Candida parapsilosis
(ATCC 22019)
Амфотерицин В (50мкг) обильный 12-15 13-17
Нистатин (50мкг) обильный 19-23 19-23
Миконазол (50 мкг) обильный 26-32 23-29
Миконазол (30 мкг) обильный 22-26 13-17
Кетоконазол (50мкг) обильный 37-45 36-44
Кетоконазол (30мкг) обильный 32-36 26-32
Интраконазол (30мкг) обильный 18-22 20-24
Флуконазол (25мкг) обильный 30-37 27-33 

 

Интерпретация результатов

Препарат  Символ Нагрузка на диск Диаметр зоны
задержки роста
Интерпретация
Полиены  Амфотерицин В
Нистатин AMB  
NYS 100µg
100µg
>10
<10
чувствительна
устойчива
Азолы Миконазол
Кетоконазол
MIC KET 50µg
50µg
>20
20-10
<10
чувствительна 
умеренно-устойчива
устойчива
  Интраконазол ITR 30µg >10
<10
чувствительна 
устойчива
  Флуконазол* FLU 25µg >19
18-13
<10
чувствительна 
умеренно-устойчива 
устойчива

 

*Согласно NCCLS используют нагрузку флуконазола только 25 мкг на диск и инкубируют только при температуре 35°C.

Референс-штаммы для контроля, рекомендуемые NCCLS
Candida albicans ATCC 90028
Candida glabrata ATCC 90030
Candida parapsllosis ATCC 22019
Candida krusei ATCC 6258

Ссылки:

1. Rex, J.H. et al 1997 for the Subcommittee on Antifungal Suspetibility Testing of the National Committee for Clinical Laboratory Standards. Clin. Infect. Dis. 24 : 235-247
2. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1997. Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts; Approved standard M27-A. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Villanova, Pa.
3. Espinel –Ingroff et al (1992) J.Clin. Microbiol . 30: 3138-3145
4. Stiller R.L. et al (1983) J.Infec. Dis 147: 1070-1076
5. Pfaller M.A et al (1988) J.Clin.Microbiol 26: 1437-1441
6. Barry A.L. and S.D. Brown. 1996. J. Clin. Microbiol.34:2154-2157
7. Espinel- Ingroff et al (1996) J.Clin Microbiol 34 : 848-852.
8. Pfaller, M.A. et al (1996) J. Clin Microbiol 34: 1691-1693

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке.