|
Antimycotic Sensitivity Test Agar
Агар для определения чувствительности к антимикотикам
|
M1336
|
Рекомендуется для определения чувствительности к антимикотикам диск-диффузионным методом.
Состав**:
|
Ингредиенты
|
грамм/литр
|
|
Казеина гидролизат ферментативный
|
19,00
|
|
Дрожжевой экстракт
|
10,00
|
|
Глюкоза
|
20,00
|
|
Натрия цитрат
|
10,00
|
|
Натрий фосфорнокислый двузамещенный
|
1,00
|
|
Агар
|
25,00
|
|
ph готовой среды (при 25°С) 6,6 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 85, 00 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 минут. Хорошо перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
МЕТОДИКА
1. Приготовление чашек со средой.
Налить 15 мл готовой среды в 90 мм чашку (толщина слоя агара около 2,4 мм) или 5 мл в чашку диаметром 50 мм. Подсушить чашки со средой 15 минут при 37 °С.
2. Приготовление инокулята:
Снять хорошо изолированные колонии 24-часовой культуры на среде Декстрозный агар Сабуро (Sabouraud Dextrose Agar M063) и суспендировать в стерильном 0,85% растворе NaCl, доводя мутность суспензии до 0,5 единиц МакФарланда.
3. Инокуляция:
Внести на подсушенные чашки приготовленный инокулят: 5 мл – в 90 мм чашку; 2 мл – в 50 мм чашку. Отсосать пипеткой излишнюю жидкость и оставить чашки при комнатной температуре на 15 минут. После этого, используя пинцет, положить диски с антифунгальными препаратами.
4. Инкубация:
Оставить чашки с дисками при комнатной температуре на 30 минут (для предварительной диффузии) и затем инкубировать при 37 °С 24-48 часов.
Контроль качества:
| Препарат (мкг/диск) |
Рост культуры |
Размеры зон задержки роста (мм) |
| |
|
Candida albicans
(ATCC 90028) |
Candida parapsilosis
(ATCC 22019) |
| Амфотерицин В (50мкг) |
обильный |
12-15 |
13-17 |
| Нистатин (50мкг) |
обильный |
19-23 |
19-23 |
| Миконазол (50 мкг) |
обильный |
26-32 |
23-29 |
| Миконазол (30 мкг) |
обильный |
22-26 |
13-17 |
| Кетоконазол (50мкг) |
обильный |
37-45 |
36-44 |
| Кетоконазол (30мкг) |
обильный |
32-36 |
26-32 |
| Интраконазол (30мкг) |
обильный |
18-22 |
20-24 |
| Флуконазол (25мкг) |
обильный |
30-37 |
27-33 |
Интерпретация результатов
| Препарат |
Символ |
Нагрузка на диск |
Диаметр зоны
задержки роста |
Интерпретация |
| Полиены |
Амфотерицин В
Нистатин AMB |
NYS |
100µg
100µg |
>10
<10 |
чувствительна
устойчива |
| Азолы |
Миконазол
Кетоконазол |
MIC KET |
50µg
50µg |
>20
20-10
<10 |
чувствительна
умеренно-устойчива
устойчива |
| |
Интраконазол |
ITR |
30µg |
>10
<10 |
чувствительна
устойчива |
| |
Флуконазол* |
FLU |
25µg |
>19
18-13
<10 |
чувствительна
умеренно-устойчива
устойчива |
*Согласно NCCLS используют нагрузку флуконазола только 25 мкг на диск и инкубируют только при температуре 35°C.
|
Референс-штаммы для контроля, рекомендуемые NCCLS
|
|
Candida albicans ATCC 90028
|
|
Candida glabrata ATCC 90030
|
|
Candida parapsllosis ATCC 22019
|
|
Candida krusei ATCC 6258
|
Ссылки:
1. Rex, J.H. et al 1997 for the Subcommittee on Antifungal Suspetibility Testing of the National Committee for Clinical Laboratory Standards. Clin. Infect. Dis. 24 : 235-247
2. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1997. Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts; Approved standard M27-A. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Villanova, Pa.
3. Espinel –Ingroff et al (1992) J.Clin. Microbiol . 30: 3138-3145
4. Stiller R.L. et al (1983) J.Infec. Dis 147: 1070-1076
5. Pfaller M.A et al (1988) J.Clin.Microbiol 26: 1437-1441
6. Barry A.L. and S.D. Brown. 1996. J. Clin. Microbiol.34:2154-2157
7. Espinel- Ingroff et al (1996) J.Clin Microbiol 34 : 848-852.
8. Pfaller, M.A. et al (1996) J. Clin Microbiol 34: 1691-1693
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке.
