 |
 |
|||||
|
|
|
Всего посетителей: 3835825
|
|
 
|
Основа хромогенного агара МакКонки с сорбитом
Хромогенная среда HiCrome MacConkey Sorbitol Agar рекомендуется для селективного выделения E. coli O157:Н7 из пищевых продуктов и кормов для животных.
Состав*:
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0.2 Приготовление:Размешать 25,06 г порошка в 495 мл дистиллированной воды. Осторожно прокипятить до полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ! Остудить до 50°С.Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. При необходимости перед розливом в чашки в 495 мл расплавленной и охлажденной(до 50°С) среды можно внести растворенное содержимое 1 флакончика с селективной добавкой FD147. Принцип и оценка результата:Агар МакКонки с сорбитом готовится в соответствии с прописью F. Rappaport и Е. Henigh (1). В его составе лактоза заменена на сорбит, так как энтерогеморрагические штаммы E. coli O157:Н7 ферментируют лактозу, но не сорбит, и поэтому формируют на данной среде бесцветные колонии (2). Штаммы E. coli, ферментирующие сорбит, образуют на ней розово-красные колонии. Красное окрашивание обусловлено реакцией индикатора нейтрального красного, так как кислые продукты разложения сорбита сдвигают рН среды ниже 6,8. E. coli O157:Н7 является возбудителем геморрагического колита (3). В соответствии с данными S.В. March и S. Ratnam (2), чувствительность агара МакКонки с сорбитом по отношению к E. coli O157:Н7 составляет 100 %, специфичность – 85 %, поэтому он рекомендован для скрининга данных микроорганизмов. Индикатор В.С. добавляется в состав среды для выявления β-D-глюкуронидазной активности обычных E. coli (4), которые на такой среде формируют сине-зеленые колонии. E. coli O157:Н7 не проявляют β-D-глюкуронидазную активность (5), поэтому образуют на данной среде бесцветные колонии. Штаммы E.coli, ферментирующие сорбит и обладающие β-D-глюкуронидазной активностью, формируют колонии сине-зеленого цвета. Ферментативный гидролизат казеина и протеозопептон являются источниками соединений азота и углерода, а также других питательных веществ. Кристаллический фиолетовый и соли желчных кислот подавляют роста большинства грамположительных микроорганизмов. Хлорид натрия обеспечивает изотоничность среды. Внесение в среду теллурита и цефексима (FD147) придает среде дополнительную селективность (6). Теллурит способствует росту штаммов серогруппы О157, подавляя рост кишечных палочек других серогрупп, а также аэромонад и провиденций. Цефексим подавляет рост протеев. Если в материале присутствуют псевдомонады, они образуют на данной среде бесцветные колонии. Для их определения можно провести в течение 5-10 сек оксидазный тест. Контроль качества:Внешний вид порошка: Гомогенный порошок светло-розового цвета. Плотность готовой среды: По плотности соответствует 1,5 % агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды: В чашках Петри формируется гель красновато-фиолетового цвета. Кислотность среды: При 25°С 5,01 %-й (вес/об) водный раствор имеет рН 7,1 ± 0.2. Культуральные свойства: Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч (при необходимости – через 48 ч) при 35-37°С.
Примечания: * цвет колоний на среде без добавки FD147 Ссылки:1. Rappaport F. and Henigh Е., (1952), J. Clin. Path., 5:361. Условия и сроки хранения:Хранить порошок при температуре ниже 8°С в плотно закрытой таре. Использовать до даты, указанной на этикетке.
|
