Основа хромогенного агара для E. coli O157:Н7

M1430

Эта хромогенная среда рекомендуется для селективного выделения и быстрой идентификации E. coli O157:Н7 из пищевых продуктов.

Рост на среде HiCrome EC0157:H7 Agar Base (M1430) Escherichia coli 0157:H7 (темно-синие или черные) и Pseudomonas aeruginosa (светло-розовые)

 

>Состав*:

Ингредиенты	грамм/литр
Ферментативный гидролизат казеина	20,0
Пептон специальный	15,0
Протеозопептон	5,0
Дрожжевой экстракт	5,0
Сорбит	10,0
Натрия хлорид	5,0
Хромогенная смесь	5,2
Агар-агар	15,0

Конечное значение рН (при 25°С) 6,9 ± 0.2
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 80,20 г порошка в 990 мл дистиллированной воды. Осторожно прокипятить до полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ! Остудить до 50°С. Перед розливом в чашки в расплавленную среду асептически внести растворенное содержимое 1 флакончика с селективной добавкой FD187. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Этот агар готовится в соответствии с прописью F. Rappaport и Е. Henigh (1). В его составе лактоза заменена на сорбит, а индикатор рН – на хромогенную смесь. Данный агар рекомендуется для селективного выделения и легкой идентификации энтерогеморрагических штаммов E. coli O157:Н7, которые, как известно, не ферментируют сорбит (2). Штаммы E. coli, ферментирующие сорбит, образуют на ней светло-зеленые колонии. Хромогенная смесь добавляется в состав среды для выявления β-D-глюкуронидазной активности, характерной для обычных E. coli (3), которые на такой среде формируют сине-зеленые колонии. E. coli O157:Н7 не проявляют β-D-глюкуронидазную активность (4), поэтому образуют на данной среде темно-синие колонии, окруженные зоной черного преципитата.

Ферментативный гидролизат казеина и протеозопептон являются источниками соединений азота и углерода, а также других питательных веществ. Кристаллический фиолетовый и соли желчных кислот подавляют роста большинства грамположительных микроорганизмов. Хлорид натрия обеспечивает изотоничность среды. Вводимая в среду добавка (FD187) придает ей селективные свойства (5). Теллурит калия позволяет выявлять эшерихии указанной серогруппы и подавляет рост аэромонад и провиденций. Новобиоцин подавляет рост грамположительных бактерий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный порошок розово-бежевого цвета.

Плотность готовой среды:

По плотности соответствует 1,5 % агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-желтого цвета.

Кислотность среды:

При 25°С 8,02 %-й (вес/об) водный раствор имеет рН 6,9 ± 0.2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (ATCC)	Рост	Цвет колоний
Escherichia coli O157:H7	Обильный	От темно-синего до черного
Escherichia coli (25922)	Слабый или хороший	Светло-зеленые
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Хороший или обильный	Светло-розовые
Klebsiella pneumoniae (13883)	Рост отсутствует	-

Ссылки:

1. Rappaport F. and Henigh Е., (1952), J. Clin. Path., 5:361.
2 March S. В. and Ratnam S., (1986), J. Clin. Microbiol., 23, 869-872.
3. Hansen W. and Yourassansky Е., (1984), J. Clin. Microbiol., 20:1177.
4. Thompson et al., (1990), J. Clin. Microbiol., 29, 2165-68.
5. Zadik P.М., Chapman P. А. and Siddons С.А. (1993) J. Med. Microbiol., 39, 155-158.

Условия и сроки хранения:

Хранить порошок при температуре ниже 8°С в плотно закрытой таре.

Использовать до даты, указанной на этикетке.