 |
 |
|||||
|
|
|
Всего посетителей: 3835765
|
|
 
|
Основа колумбийского кровяного агара
Эта среда используется в качестве эффективной основы для приготовления кровяного, шоколадного агаров, а также различных селективных и дифференциальных сред.
Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 44,0 г порошка М144 или 39,0 г порошка М144А в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 40-50°С и асептично внести указанные ниже термочувствительные ингредиенты. Для приготовления кровяного агара: стерильную дефибринированную кровь барана (до 5% об/об). Для приготовления шоколадного агара: стерильную дефибринированную кровь барана (до 10% об/об), прогреть при 80°С в течение 10 мин при постоянном помешивании. Среду можно сделать селективной путем добавления к стерильной основе различных антимикробных веществ (специальных добавок). Для культивирования бруцелл: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для бруцелл (FD161). Для культивирования кампилобактеров: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька с одной из селективных добавок для кампилобактеров (FD006, FD165, FD008, FD090 или FD106) и 1 пузырька с ростовой добавкой для кампилобактеров (FD009). Для культивирования гарднерелл: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для гарднерелл (FD056). Для культивирования стрептококков: добавить в 500 мл расплавленной стерильной основы растворенное в воде содержимое 1 пузырька со стрептококковой добавкой (FD030 или FD031). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри. Принцип и оценка результата:Эту среду разработали Ellner и соавт.(1). Присутствие специального пептона обеспечивает быстрый и обильный рост на ней даже прихотливых микроорганизмов. Кроме того, на ней вырастают типичные колонии, лучше проявляется пигментообразование и более четкие гемолитические реакции. Колумбийский агар используют для приготовления кровяных и селективных сред с различными сочетаниями антибиотиков. Кукурузный крахмал служит источником энергии и одновременно нейтрализует токсические метаболиты. Баранья кровь позволяет оценить способность микробов к гемолизу и обеспечивает их гемином (Х фактором), который необходим для роста многих бактерий. Вместе с тем в среде нет фактора V (никотинамидадениндинуклеотида), поэтому Haemophilus influenzae, имеющие потребность в обоих факторах (Х и V), на этой среде расти не будут. Ввиду относительно высокого содержания углеводных компонентов бета-гемолитические стрептококки могут давать на этой среде зеленоватые зоны гемолиза, которые можно ошибочно принять за альфа-гемолиз. В этой связи для подтверждения требуется проведение дополнительных тестов. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М144) или 1%-ному (М144А) агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды:Основа среды имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует при затвердевании. После добавления к основе стерильной дефибринированной крови (до 5% об/об) среда имеет вишнево-красный цвет и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водные растворы М144 (4,4% вес/об) или М144А (3,9% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35-37°С.
Ссылки:1. Ellner, Stoessel, Drakeford and Vasi, 1966, Am. J. Clin. Pathol., 45:502 Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|
