Основа дифференциального агара для листерий (среда Оттовани) (Ottaviani; ALOA Medium)

Этот агар специалисты международного комитета ISO рекомендуют для селективного выделения и идентификации Listeria monocytogenes (1).

 Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 36,0 г порошка в 460 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50 °С и асептически добавить содержимое 1 флакончика с обогатительной добавкой L.mono (FD214), растворенное содержимое 1 флакончика с селективной добавкой L.mono I (FD212AR). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит, поэтому рекомендуется избегать контакта с ним и вдыхания его паров; при попадании на кожу надо немедленно смыть реактив большим количеством воды.

Принцип и оценка результата:

Этот агар основан на прописи Ottoviani и Agosti (2, 3) для селективного выделения и идентификации Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов для животных; он принят и одобрен комитетом ISO.
Мясной пептон, гидролизат казеина, пируват натрия и дрожжевой экстракт являются источниками азотистых питательных веществ и витаминов, необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза является ферментируемым субстратом. Хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление, а фосфат придает среде буферные свойства. Хлорид лития и входящие в состав добавки FD212AR селективные компоненты подавляют рост сопутствующей микрофлоры, обеспечивая рост листерий. Последние в результате гидролиза хромогенного субстрата образуют зеленые колонии. Дифференциация Listeria monocytogenes от других листерий основана на выявлении активности фосфатидилинозит-специфичной фосфолипазной С активности (PIPLC). Фермент фосфолипаза С гидролизует очищенный субстрат (FD214), добавляемый в среду. В результате этого вокруг колоний Listeria monocytogenes формируется зона помутнения среды.

ВНИМАНИЕ!

В состав FD212AR Селективная добавка L.mono I, входит FD213 (Селективная добавка L.mono II)!

Добавки FD212 и FD213 объединены в FD212AR!!!

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-бежевый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5% агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, опалесцирует, когда в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (7,2% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С
(с инкубацией после внесения селективных добавок L.mono - FD212AR, а также обогатительной добавки L.mono – FD214).

Примечание: * о наличии фосфатидилинозитфосфолипазной активности свидетельствует непрозрачная зона вокруг колоний.

Ссылки:

1. Draft Amendment ISO 11290-2:1996/DAM 1.
2. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.
3. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p. 6, A.D.R.I.A. Quimper, France, 16-18 June 1997.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре +2…8°С. Использовать до даты, указанной на этикетке.