|
|
Всего посетителей: 3851030
|
|
|
Основа среды Левенштейна–Йенсена без крахмала
Среда Левенштейна–Йенсена без крахмала рекомендуется для оценки чувствительности микобактерий к противотуберкулезным препаратам.Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 7,24 г порошка в 600 мл дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина (для некоторых видов микобактерий глицерин не добавлять). Прокипятить до полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210С) в течение 15 мин. Приготовить стерильно 1000 мл эмульсии яиц. Асептически смешать 600 мл основы среды и 1000 мл яичной эмульсии до однородного состояния. Внести добавку Графта (Gruft Micobacterial Supplement FD053), если это необходимо. Разлить по пробиркам. Поместить пробирки в наклонном положении для формирования скошенной среды и прогревать (для коагуляции) при 850С в течение 45 мин. Принцип и оценка результата:Оригинальная пропись Левенштейна (1) была модифицирована Йенсеном (1), а Графт изменил среду добавлением двух антимикробных агентов (3,4). Основа среды Лвенштейна-Йенсена без крахмала рекомендована ВОЗ для оценки чувствительности микобактерий к противотуберкулезным препаратам. Среда Левенштейна-Йенсена без картофельного крахмала, с внесенными в нее препаратами, модифицирована и рекомендована для применения Международным союзом против туберкулеза. Среда, приготовленная на яичной основе, поддерживает рост различных видов микобактерий. Малахитовый зеленый, бензилпенициллин и налидиксовая кислота предотвращают рост большинства представителей сопутствующей флоры, в первую очередь той флоры, которая дает рост много раньше, чем микобактерии. РНК действует как стимулятор роста и позволяет повысить уровень высеваемости. Если могут быть выделены культуры бычьего или других глицерофобных видов микобактерий, глицерин добавлять не нужно. Малахитовый зеленый является не только ингибитором роста, но и pH-индикатором. Появление синих зон указывает на повышение кислотности за счет роста грамположительных контаминантов (например, Streptococcus spp.), желтые зоны выявляют контаминацию грамотрицательными бациллами. Контроль качества: Внешний вид порошка: Гомогенный сыпучий порошок зеленовато-синего цвета. Цвет и прозрачность готовой среды: Готовая среда имеет светлый голубовато-зеленый цвет с гладкой, слегка опалесцирующей поверхностью. Культуральные свойства: Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 350С в атмосфере 5 - 10% углекислого газа.
Ссылки:1.Lowenstein E., 1931, Zentralb. Bacteriol., Parasitenkd. Infektionskr. Abt.I. Orig. 120:127. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже 30 °С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.
|