 |
 |
|||||
|
|
|
Всего посетителей: 3835774
|
|
 
|
Агар с сердечной вытяжкой и цистином
Эту среду с добавлением гемоглобина используют для культивирования Francisella tularensis. Без обогащающих добавок она способствует отличному росту грамотрицательных кокков и других, в том числе патогенных микроорганизмов.
Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимых параметров.
Размешайте 51,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте до кипения для растворения компонентов среды полностью. Стерилизуйте автоклавированием при 1,1 атм. (121ºС) в течение 15 мин.
б) с обогащением: 1. Суспендируйте 10,2 г порошка в 100,0 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешайте. 2. Нагрейте с частым перемешиванием до кипения до растворения компонентов среды полностью. 3. Автоклавируйте при 121 ° С в течение 15 минут. Охладите до 50° C. 4. Добавьте 100,0 мл стерильного 2% раствора гемоглобина и тщательно перемешайте, избегая образования пены. • 2% раствор гемоглобина приготовьте следующим образом: Поместите 2,0 г порошка гемоглобина в сухую колбу. Добавьте 100,0 мл холодной дистиллированной воды при энергичном перемешивании. Продолжите прерывистое перемешивание в течение 10-15 минут до тех пор, пока гемоглобин раствориться полностью. Автоклавируйте при 121 ° С в течение 15 минут. Охладите до 50 ° С. 5. Внесите в стерильные чашки Петри или пробирки. 6. Испытайте образцы готового продукта с помощью стабильных, типичных контрольных культур.
Эта среда рекомендована специалистами АРНА (1) для культивирования Francisella tularensis. Francis (2) сообщил, что кровяно-цистиновый агар с глюкозой является хорошей питательной средой. Chaw (3) внес 0,05% цистина и 1% глюкозы в агаризованный настой сердца и получил среду для культивирования возбудителя туляремии. Rhamy (4), используя среду Francis, добавил в нее автоклавированный раствор гемоглобина и подтвердил пригодность такой среды для культивирования Francisella tularensis. Эта среда богата питательными веществами, которые позволяют использовать ее для культивирования многих других микроорганизмов, которые обычно трудно выращивать на питательных средах.
Внешний вид порошка: Гомогенный сыпучий порошок бежевого цвета.
Плотность готовой среды: Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды: Среда янтарного цвета, прозрачная с легкой опалесценцией. При добавлении гемоглобина среда приобретает коричнево-шоколадный цвет.
Кислотность среды: При 25ºС водный раствор (5,1% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства референс-штаммов через 40-48 ч при 35ºС с обогащением 2%гемоглобином.
Интерпретация: рост культуры как обильный, хороший, слабый, скудный или отсутствие роста, выраженный в % выросших колоний по отношение к количеству засеянных микроорганизмов: Рост культуры (посевная доза 10 2-10 3 КОЕ/мл): % от засеянных Обильный: >70 %; Хороший: > 40 % но <70 %; Плохой: > 20 % но <40 %; Скудный – слабый: > 10 % но <20%; Скудный: > 10 %; Нет роста: нет видимых колоний
Условия и сроки хранения: хранить при температуре ниже +30ºС в плотно закрытом контейнере. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.
Источники литературы: 1. Murray P. R., Baron J. H., Pfaller M. A., Jorgensen J. H. and Tenover F. C., Yolken R. H., (Ed.), 1999, Manual of Clinical Microbiology, 7th Ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 2. Francis, 1928, JAMA, 91:1155. 3. Shaw, 1930, Zentr. Bakt. I. Abt. Orig., 118:216. 4. Rhamy, 1933, Am. J. Clin. Pathol., 3:121. 5. Isenberg, (Ed.), 1992, Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. 1. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 6. U.S. Public Health Service, Centers for Disease Control and Prevention, and National Institutes of Health, 1999, Biosafetyin Microbiological and Biomedical Laboratories, 4th Ed., HHS Publication.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
