Cystine Heart Agar
Сердечно-цистиновый агар
М172

 

Эту среду с добавлением гемоглобина используют для культивирования Francisella tularensis. Без обогащающих добавок она способствует отличному росту грамотрицательных кокков и других, в том числе патогенных микроорганизмов.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/
литр
Настой говяжьего сердца
500,00
Протеозопептон
10,00
Глюкоза
10,00
Натрия хлорид
5,00
L-Цистин
1,00
Агар-агар
15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 51,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для обогащения гемоглобином (при необходимости) его в количестве 10,2 г размешивают в 100 мл дистиллированной воды. Стерилизуют автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин, остужают до 50°С и асептично добавляют в среду (до 2%). Тщательно перемешивают обогащенную среду и разливают ее в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда рекомендована специалистами АРНА (1) для культивирования Francisella tularensis. Francis (2) сообщил, что кровяно-цистиновый агар с глюкозой является хорошей питательной средой. Chaw (3) внес 0,05% цистина и 1% глюкозы в агаризованный настой сердца и получил среду для культивирования возбудителя туляремии. Rhamy (4), используя среду Francis, добавил в нее автоклавированный раствор гемоглобина и подтвердил пригодность такой среды для культивирования Francisella tularensis. Эта среда богата питательными веществами, которые позволяют использовать ее для культивирования многих других микроорганизмов, которые обычно трудно выращивать на питательных средах.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок бежевого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. При добавлении гемоглобина среда становится коричнево-шоколадного цвета.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,1% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С в присутствии 2% гемоглобина.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Francisella tularensis (29684)
Обильный
Neisseria meningitidis (13090)
Обильный
Streptococcus pneumoniae (6303)
Обильный
Streptococcus pyogenes (19615)
Обильный

Ссылки:

1. American Public Health Association, 1950, Diagnostic Procedures and Reagents, 3rd ed., p. 259.
2. Francis, 1928, J. Am. Med. Assoc., 91:1155.
3. Shaw, 1930, Zentr. Bakt. I. Abt. Orig., 118:216.
4. Rhamy, 1933, Am. J. Clin. Path., 3:121.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.