Middlebrook 7H9 Broth Base Основа бульона Миддлбрука 7H9

M198

 

Основа бульона Миддлбрука 7Н9 с ростовой добавкой рекомендуется для выращивания и тестирования чувствительности Mycobacterium tuberculosis.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/ литр
Аммония сульфат	0,50
L-Глутаминовая кислота	0,50
Калия дигидрофосфат	1,00
Натрия гидрофосфат	2,50
Натрия цитрат	0,10
Железа аммонийного цитрат	0,04
Магния сульфат	0,05
Кальция хлорид	0,0005
Цинка сульфат	0,001
Меди сульфат	0,001
Пиридоксин	0,001
Биотин	0,0005
Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 2,35 г порошка в 450 мл дистиллированной воды. Добавить 2 мл глицерина или 0,5 г Твин - 80. Нагреть до полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121⁰С) в течении 10 мин. Остудить до 45⁰С и асептически добавить содержимое одного флакона добавки FD019 (Middlebrook ADC Growth Supplement). Хорошо перемешать.

Принцип и оценка результата:

Среда 7Н9 усовершенствована Миддлбруком с соавт. (1) для выращивания микобактерий и для исследования содержания INH в сыворотке крови больного. Среда может использоваться для приготовления посевного материала при антибактериальных исследованиях в качестве основной среды для проведения биохимических тестов и для субкультивирования музейных штаммов.

Среда 7Н9 содержит много неорганических солей, необходимых для поддержания роста микобактерий. Добавка FD019 (Middlebrook ADC Growth Supplement) содержит альбумин, глюкозу, каталазу и хлористый натрий. Некоторые свободные жирные кислоты являются токсичными по отношению к микобактериям, однако альбумин связывает такие жирные кислоты и препятствует их токсическому воздействию. Токсичные перекиси, присутствующие в среде, разрушаются каталазой. Глюкоза, как источник энергии, поддерживает рост бактерий. Хлористый натрий поддерживает осмотическое давление среды, а глицерин усиливает рост микобактерий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Светлого янтарного цвета прозрачный раствор без осадка.

Кислотность среды:

При 25⁰С водный раствор (0,47% вес/об), содержащий глицерин или Твин-80, имеет pH 6,6+0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
M.tuberculоsis H37 Rv(25618)	Обильный или хороший
M.smegmatis(14468)	Обильный или хороший
M.fortuitum(6841)	Обильный или хороший

Ссылки:

1. Middlebrook and Cohn, 1958, Am. J. Public Health, 48:844.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.