Fletcher Leptospira Medium Base Основа среды Флетчера для лептоспир

M239

 

Эту среду с добавлением сыворотки используют для выделения, культивирования и хранения видов Leptospira.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/ литр
Пептический перевар животной ткани	0,30
Мясной экстракт	0,20
Натрия хлорид	0,50
Агар-агар	1,50
Конечное значение рН (при 25°С) 7,9 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 2,5 г порошка в 920 мл дистиллированной воды (объем воды рассчитывают в соответствии с объемом обогащающей добавки). Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50-55°С и асептично добавить 80 мл стерильной обогатительной добавки (сыворотки крови кролика или лошади), чтобы общий объем среды составил 1 л.

Принцип и оценка результата:

Эту среду готовят по прописи Флетчера (1) и используют для выделения лептоспир из крови, мочи или почечной ткани (2). Обогатительная добавка служит источником длинноцепочечных жирных кислот, необходимым для роста лептоспир источником углерода, энергии и витаминов. Лептоспиры метаболизируют жирные кислоты путем бета-окисления, конечными продуктами которого являются ацетат и двуокись углерода.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,15%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтоватую окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (0,25% вес/об) имеет рН 7,9 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов в течение 5 дней при 30°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
Leptospira interrogans serotype australis	Обильный
Leptospira interrogans serotype canicola	Обильный Обильный
Leptospira interrogans serotype grippotyphosa

Ссылки:

1. Fletcher, 1927, Trans. Roy. Soc. Trop. Med. and Hyg., 21:265.
2. Galton, Acree, Lewis and Bather, 1956, J. Amer. Vet. Med. Assoc.,128:87.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.