Phenylalanine Agar Фенилаланиновый агар

M281

 

Этот агар используют для дифференциации протеев и провиденций от других энтеробактерий по их способности образовывать из фенилаланина фенилпировиноградную кислоту.

 

Тест на фенилаланиндезаминазу на среде Phenylalanine Agar (M281), слева направо: 1. Контроль (незасеянная среда)  2. Proteus vulgaris  3. Escherichia coli

 

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Дрожжевой экстракт	3,00
Натрия хлорид	5,00
DL-фенилаланин	2,00
Натрия гидрофосфат	1,00
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 26,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить в наклонном положении для формирования скоса.

Принцип и оценка результата:

Этот агар разработан Юингом и соавт. (1). Морганеллы, протеи и провиденции способны дезаминировать фенилаланин с образовыванием фенилпировиноградной кислоты (2), что имеет важное значение для дифференциации энтеробактерий (3).

Дрожжевой экстракт обеспечивают среду необходимыми веществами для роста микроорганизмов. DL-фенилаланин является субстратом для ферментации, из которого на воздухе образуется фенилпировиноградная кислота. При положительной реакции после нанесения на микробный рост нескольких капель 10%-ного раствора хлорида железа развивается зеленое окрашивание. При отрицательной реакции цвет среды и роста не меняется. Результат учитывают в течение 5 минут после нанесения реактива, т.к. зеленый цвет быстро бледнеет (3, 4).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2,6% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Фенилаланиндезаминаза
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	–
Escherichia coli (25922)	Обильный	–
Proteus vulgaris (13315)	Обильный	+
Proteus mirabilis (25933)	Обильный	+
Providenсia alcalifaciens (12013)	Обильный	+

Примечание:
"+" - положительная реакция, зеленый цвет среды после внесения 10%-ногорастворахлоридажелеза

Ссылки:

1. Ewing W. H., Davis B. R. and Reavis R. W., 1957, Public Health Lab., 15:153.
2. Henrikson, 1950, J. Bact., 60:225.
3. Singer J. and Volcani B. E., 1955, J. Bact., 69:303.
4. MacFaddin J. F., 1985, Media For Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.