Soyabean Casein Digest Agar / Medium (Tryptone Soya agar / Broth) Триптон-соевый агар	M290
Soyabean Casein Digest Medium (HiVeg Sterile Powder) Соевый бульон с казеиновым переваром (триптон-соевый бульон) (cтерилизовано гамма-облучением) (предназначен для оценки стерильности жидкостей, применяемых в фармацевтическом производстве (методом растворения – MFT))	M011GR

 

Эти среды используют в качестве основных для культивирования широкого круга микроорганизмов. 

Соевый бульон с казеиновым переваром (из растительного сырья, стерильный)(триптон-соевый бульон) в виде порошка, стерилизованного гамма-излучением (ϒ) предназначен для оценки стерильности жидкостей, применяемых в фармацевтическом производстве (методом растворения – MFT). Рекомендуется различными национальными и международными фармакопеями. Также он используется для тестирования  активности  антимикробных агентов  методом разведения в пробирках. В среде HiVeg Soyabean Casein Digest Medium пептон животного происхождения полностью заменён на гидролизат HiVeg из растительного сырья. Это делает среду свободной от рисков, связанных с BSE/ TSE.

Рост на среде Antibiotic Assay Medium No. 37 (M011GR), слева направо: 1.Streptococcus pyogenes 2.Staphylococcus aureus  3.Escherichia coli 4.Контроль

 

Состав**:

Ингредиенты	М290 грамм/литр	М011GR грамм/литр
Гидролизат казеина	15,00	17,00
Папаиновый перевар соевой муки	5,00	3,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Калия гидрофосфат	–	2,50
Глюкоза	–	2,50
Агар-агар	15,00	–
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Применение:

Среда HiVeg Soyabean Casein Digest Medium используется для тех же целей, что и Соевый бульон с казеиновым переваром. Стерилизованный ϒ- лучами бульон рекомендован Фармакопеями для контроля стерильности в производственных процессах, в том числе в фармацевтической промышленности, методом MFT (Media Fill Trials); для тестирования чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам методом серийных разведений; в качестве основной среды для культивирования широкого круга микроорганизмов.

Приготовление:

Размешать 40,0 г порошка М290 или 30,0 г порошка М011GR в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. ИЗБЕГАЙТЕ ПЕРЕГРЕВАНИЯ, среда НЕ ТРЕБУЕТ АВТОКЛАВИРОВАНИЯ. Асептически разлейте в стерильные пробирки или колбы или как необходимо.

Примечание 1.

Если в растворе наблюдаются волокна, рекомендуется его фильтровать через фильтр 0,22 микрон, чтобы исключить любую возможность наличия волокон. В случае невозможности приготовления среды МV011GR в асептических условиях, суспендируйте 30,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Нагрейте до кипения  для растворения компонентов среды полностью. Стерилизуйте в автоклаве при 1,1 атм. (121ºС) в течение 15 мин. При необходимости, асептично внесите в предварительно остуженную до 45-50ºС среду дефибринированную кровь (до 5% об/об). Разлейте как необходимо.

Принцип и оценка результата:

В разных фармакопеях триптон-соевый бульон рекомендуют для тестов на стерильность (1, 2). Его используют также для тестов на чувствительность к антимикробным веществам методом серийных разведений (3). Пропись Триптон-соевого агара (М290) соответствует рекомендациям американской фармакопеи (1) и используется в тестах на эффективность консервации и присутствие микроорганизмов. Эту среду можно использовать для фаготипирования, колицинотипирования, потребности видов Haemophilusв факторах X и V (4). Gunn и соавт. (5) использовали эту среду с добавлением 5% крови (об/об) для изучения гемолитических реакций. Если на основе данной среду готовят шоколадный агар, на ней хорошо растут нейссерии, Haemophilusinfluenzae и т.п.

Комбинация гидролизата казеина и папаинового перевара соевой муки придает среде питательность, т.к. они являются источником аминокислот и длинноцепочечных пептидов, необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза и фосфат служат, соответственно, источником углевода и буфером, которые необходимы особенно в среде М011GR. Хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление в обеих средах.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М290).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-желтый цвет, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель. Если в среду добавляется кровь, она становится вишнево-красной.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М290 (4,0% вес/об) или М011GR (3,0% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост (без крови)	Рост (с кровью)*	Гемолиз
Candida albicans (10231)	Обильный	Обильный	–
Staphylococcusaureus (25923)	Обильный	Обильный	b
Streptococcuspyogenes(19615)	Хороший или обильный	Обильный	b
Bacillus subtilis (6633)	Обильный	Обильный	Отсутствует
Bacteroidesvulgatus(8482)	Обильный	Обильный	Отсутствует
Neisseria meningitidis (13090)	Обильный	Обильный	Отсутствует

Примечание: рост на среде М290

Ссылки:

1. The United States Pharmacopoeia / National Formulary, 1995, 23/18, The United States Pharmacopeial Convention Inc., Rockville, MD.
2. Indian Pharmacopeia, 1996, Govt. of India, Ministry of Health and Family Welfare, New Delhi, India.
3. Wright and Welch, 1959-60, Antibiotics Ann., 61.
4. Blair J. E. and Carr M., 1953, S. Infect. Dis. 93:1-13.
5. Gunn. B. A. et al, 1977, J. Clin. Microbiol., 5(6) : 650.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.