Tinsdale Agar Base Основа агара Тинсдаля

М314

 

Эту среду используют для селективного выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	20,00
Натрия хлорид	5,00
L-Цистин	0,24
Натрия тиосульфат	0,43
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 40,7 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично внести добавку FD073 (части А и В). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда первоначально предложена Тинсдалем (1), а затем модифицирована Биллингсом (2) для селективного выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae.

Пептический перевар животной ткани служит источником азотистых питательных веществ, а L-цистин и тиосульфат натрия образуют индикаторную систему на сероводород. Вносимый в составе добавки теллурит калия подавляет рост всех грамположительных бактерий и большинства микроорганизмов, входящих в состав микрофлоры верхних дыхательных путей.

Corynebacterium diphtheriae, в отличие от большинства дифтероидов верхних дыхательных путей, формируют на данной среде серо-черные колонии, окруженные темно-коричневым ореолом (в результате продукции из цистина сероводорода и его связывания с теллуритом калия). Среда Тинсдаля идеально подходит для рутинного культивирования и выделения Corynebacterium diphtheriae, которые стабильно образуют на ней темно-коричневый ореол (3). Поскольку колонии Corynebacterium ulcerans – дифтероидов верхних дыхательных путей – похожи на колонии Corynebacterium diphtheriae, для их дифференциации нужны дополнительные биохимические тесты (2).

Не рекомендуется инкубировать среду в атмосфере 5-10% углекислого газа, так как это замедляет появление характерного ореола вокруг колоний (4)

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-янтарный цвет, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,07% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Характер колоний
Corynebacterium diphtheriae
var gravis	Хороший или обильный	Коричневые или черные с ореолом
var mitis	Хороший или обильный	Коричневые или черные с ореолом
var intermedius	Хороший или обильный	Коричневые или черные с ореолом
Streptococcus pyogenes (19615)	Хороший	Точечные черные без ореола
Klebsiella pneumoniae (13883)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Tinsdale G.F., 1955, J. Path. and Bacteriol., 59:461.
2. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
3. Moore M.S. and Parsons E.I.M, 1958, J. Infect. Dis., 102:88.
4. Lennette and others (Eds.), 1985, Manual of Clinical Microbiology, 4th ed. ASM, Washington, D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С не более 72 ч после приготовления.