Spirolate Broth, OMATA Бульон для трепонемы Рейтера

M412

 

Этот бульон используют для получения биомассы в ходе культивирования Treponema pallidum (штамма Reiter) с целью выработки антигена или других исследований.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Гидролизат казеина	15,00
Глюкоза	5,00
Дрожжевой экстракт	5,00
Натрия хлорид	2,50
Натрия тиогликолят	0,50
L-Цистеина гидрохлорид	1,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 29,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Добавить (при необходимости) 0,25 г (ТЕМ-4TR)-диацетилового эфира винной кислоты (из моноглицеридов животного происхождения). Подогреть до кипения при частом помешивании и прокипятить в течение 1 минуты. Разлить в пробирки для тестирования, заполнив их наполовину (например, по 15-20 мл в 6-дюймовые пробирки или в другую посуду при том же соотношении площадь/объем). Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить и добавить стерильную сыворотку крови барана, кролика или крупного рогатого скота (до 10%, об/об).

Принцип и оценка результата:

Эта среда основана на прописи, предложенной Omata и Disraely (1) для культивирования фузобактерий ротовой полости. Ее используют для масштабного культивирования трепонем штамма Рейтер в безагаровой среде с целью получения антигена, других исследований, а также культивирования других спирохет. Добавление жирных кислот способствует росту трепонемы Рейтера.

Гидролизат казеина и дрожжевой экстракт обеспечивают присутствие соединений азота, микроэлементов, витаминов группы В и других факторов, необходимых для роста трепонемы Рейтера. Источником углерода является глюкоза. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление. Тиогликолят минимизирует парциальное давление кислорода, и тем самым способствует росту трепонем. L-Цистеина гидрохлорид является редуцирующим веществом, которое менее токсично для фузобактерий (1).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-соломенную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2,9% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штамма через 18-48 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
Treponema pallidum (штамм Reiter)	Хороший или обильный

Ссылки:

1. Omata and Disraely, 1956, J. Bact., 72:677.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.