|
|
Всего посетителей: 3851005
|
|
|
Основа среды для патогенных нейссерий
Этот агар с добавками используют в качестве селективной среды для выделения гонококков из патологического материала. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 21,0 г порошка в 450 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить среду до 45°С и асептично добавить 50 мл стерильной лизированной крови, растворенное в воде содержимое 1 пузырька с ростовой добавкой (FD025) и добавку V.N.C. (FD023) или добавку V.C.N.T. (FD024). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Если будет использован гемоглобин (FD022), размешать 21,0 г порошка среды в 250 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Приготовить 250 мл 2%-ного раствора гемоглобина. Стерилизовать обе части отдельно автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С, смешать части и асептично добавить селективные добавки, как описано выше. Принцип и оценка результата:Вначале Carpenter и Morton предложили среду для выделения гонококков в течение 24 ч (1). Позже было показано преимущество среды с добавлением гемоглобина и дрожжевого концентрата для выделения гонококков (2). Соответственно данная среда была разработана (3, 4) для первичного выделения Neisseria meningitidis и Neisseria gonorrhoeae из материала, содержащего смешанную микрофлору (из глотки, влагалища, прямой кишки, уретры). Для придания селективных свойств в среду добавляют ванкомицин, колистин и нистатин (4), и дополнительно триметоприм (5). Специальный пептон обеспечивает среду питательными веществами, крахмал нейтрализует токсические жирные кислоты, если они присутствуют в агаре. Гемоглобин является источником фактора Х, а фактор V (НАД) вносят с ростовой добавкой, которая содержит также витамины, аминокислоты, коферменты и другие вещества, стимулирующие рост нейссерий. Ванкомицин и колистин подавляют рост грамположительных и грамотрицательных бактерий, соответственно (6). Нистатин подавляет рост грибов. На этой среде может подавляться рост гемофильных палочек. При посеве материала из ротоглотки на ней могут вырасти некоторые штаммы Capnocytophaga. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий желтый порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,3%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды:Основа среды имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. После добавления гемоглобина и специальных добавок среда приобретает шоколадный цвет, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водный раствор (4,2% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.
Ссылки:1. Carpenter and Morton, 1947, Proc. N.Y. State Assoc. Public Hlth. Labs., 27:58. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|