 |
 |
|||||
|
|
|
Всего посетителей: 3836459
|
|
 
|
Основа агара для гонококков (Джи Си)
Этот агар с добавлением крови, гемоглобина или других добавок рекомендуют для селективного выделения гонококков. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 7,2 г порошка в 100 мл дистиллированной воды, чтобы приготовить среду двойной концентрации. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить приготовленные отдельно 100 мл 2%-ного стерильного раствора гемоглобина (FD022) и добавку GC (FD021). Тщательно перемешать и разлить в чашки Петри. Для придания селективных свойств в среду можно добавить антибиотики, входящие в следующие добавки: VNC (FD023), VCNT (FD024), Linco T (FD026), Vanco (FD028). Для приготовления шоколадного агара готовят среду обычной концентрации, размешав 3,6 г порошка в 100 мл дистиллированной воды. Стерилизуют, добавляют до 5% (об/об) стерильную дефибринированную кровь и прогревают среду при 80°С в течение 10 мин. Принцип и оценка результата:Данный агар с добавлением крови или гемоглобина и других добавок рекомендуют для селективного выделения и культивирования таких прихотливых микроорганизмов, как гонококки и гемофильные бактерии. Johnston разработал шоколадный агар, на котором можно было в течение 24 ч получить рост Neisseria gonorrhoeae (1). Позже другие авторы (2) усовершенствовали среду, введя в ее состав гемоглобин. Агар содержит специальный пептон – источник питательных веществ для микроорганизмов. Крахмал позволяет нейтрализовать образуемые нейссериями токсические вещества, а фосфаты противодействуют сдвигу рН в результате образования аминов, что также может сказаться на росте и жизнеспособности микроорганизмов. Гемоглобин служит источником фактора Х для гемофильных бактерий. Другая добавка обогащает среду фактором V (НАД, никонинамидадениндинуклеотид), необходимым для гемофильной палочки, а также аминокислотами, витаминами, ионами железа и т.п., что стимулирует рост патогенных нейссерий. Не применяйте тампоны из хлопка для сбора материала. Посев осуществляйте сразу после отбора материала. Его надо сделать так, чтобы были зоны густого и редкого роста. Посев инкубируют при 37°С в атмосфере 5-10% углекислоты и 70% влажности. Все подозрительные колонии надо проверить в биохимических и/или серологических тестах. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды:Основа среды имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. После добавления гемоглобина среда становится шоколадно-коричневой и непрозрачной, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водный раствор (3,6% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штамма через 40-48 ч при 35-37°С на шоколадном агаре, приготовленном на этой основе, в присутствии в атмосфере 5-10% углекислоты и 70% влажности .
Примечание: * - с добавкой антибиотиков Ссылки:1. Johnston, 1945, J. Vener. Dis. Inform., 26:239. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|