Spirit Blue Agar Агар со спиртовым синим

M445

 

Эту среду используют для определения и подсчета липолитических микроорганизмов.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Гидролизат казеина	10,00
Дрожжевой экстракт	5,00
Спиртовой синий	0,15
Агар-агар	17,00
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 32,15 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично медленно добавить 30 мл субстрата для липазы (при помешивании, чтобы равномерно его распределить в среде).

Принцип и оценка результата:

Эту среду готовят в соответствии с прописью Starr (1). Она является основой, в которую добавляют липоидный субстрат для определения и подсчета липолитических микроорганизмов. Раньше для этого на практике в качестве индикаторов липолиза применяли красители, но иногда они подавляют рост микроорганизмов. Как показал Starr, спиртовой синий инертен и в этом смысле является идеальным индикатором липолиза.

В качестве субстратов для выявления липазной активности рекомендуют применять муку из хлопковых семян, оливковое масло и др. Подходящую эмульсию можно приготовить, растворив 10,0 г масла акации или 1,0 г твина-80 в 400 мл теплой дистиллированной воды и добавив при тщательно перемешивании 100 мл хлопкового или оливкового масла.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий серовато-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,7%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет голубую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. При добавлении липазного субстрата среда приобретает цвет лаванды и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (3,22% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Липаза
Proteus mirabilis (25933)	Обильный	–
Staphylococcus aureus (25923)	Обильный	+
Staphylococcus epidermidis (12228)	Обильный	+

Ссылки:

1. Starr, 1941, Science, 93:333.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.