Основа модифицированной среды Картофа для лептоспир

Эту среду используют для культивирования и хранения лептоспир.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

1) Основа среды:

Размешать 3,42 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить по 100 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 15 мин. Остудить до 55°С.

2) Раствор гемоглобина:

К сгустку крови (после удаления сыворотки) добавить такой же объем дистиллированной воды. Провести несколько циклов замораживания-оттаивания для разрушения частиц. Стерилизовать фильтрованием (через мембранный или фильтр Зейтца).

3) Полная среда:

На каждые 100 мл стерильной основы добавить по 8 мл инактивированной сыворотки крови и 0,8 мл стерильного раствора гемоглобина. Тщательно перемешать. Разлить по 2-3 мл в стерильные пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками. Проверить на стерильность инкубированием при 37°С.

Принцип и оценка результата:

Эта среда описана Korthof (1) для культивирования и хранения лептоспир.

Пептический перевар животной ткани и соли, удовлетворяя питательные потребности, способствуют росту лептоспир. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды, а хлорид натрия – оптимальное осмотическое давление.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтовато-коричневую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует после добавления сыворотки крови и гемоглобина.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (0,342% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов в течение 2-7 суток при 30°С.

Ссылки:

1. Korthof G., 1932, Zentralbl. Bakteriol. Parasitenkd. Infektionskr. Hyg. Abt. I. Orig., 125:429.
2. Rechcigl M. Jr. (Ed.), 1978, Handbook Series in Nutrition and Food, Vol. III, CRC Press.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.