Trichomonas Modified CPLM Medium Base
Основа модифицированной среды для трихомонад
М460

 

Эту среду с добавками лошадиной сыворотки и антибиотиков рекомендуют для культивирования трихомонад

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Пептический перевар животной ткани
32,00
Печеночный перевар
20,00
Мальтоза
1,60
L-Цистеина гидрохлорид
2,40
Раствор Рингера, разведенный в 4 раза
до 1 литра
Конечное значение рН (при 25°С) 6,0 ± 0,2
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 56,0 г порошка в 900 мл стерильной дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить во флаконы по 90 мл. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 10 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить на каждые 90 мл среды следующее.

1.Стерильную инактивированную сыворотку крови лошади
10 мл
2.Стерильный пенициллин-стрептомициновый раствор
1 мл
3.Стерильный раствор нистатина
1 мл

 

Тщательно перемешать и асептично разлить в необходимом количестве.

Состав пенициллин-стрептомицинового раствора:

Пенициллин
100 000 ЕД
Стрептомицин
0,1 г
Стерильной дистиллированной воды
10 мл

 

Состав раствора нистатина:

Нистатин
500 00 ЕД
Стерильной дистиллированной воды
10 мл

 

Для обычных пересевов антибиотики добавлять не надо, но для диагностических исследований и получения чистой культуры это важно.

Принцип и оценка результата:

Эта среда готовится на основе прописи среды Джонсона и Трасселя (1), но в ней нет агар-агара и метиленового синего (2).

Пептический перевар животной ткани и печеночный перевар служат источником азотистых питательных веществ, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. L-Цистеина гидрохлорид является редуцирующим веществом. Антибиотики подавляют рост бактерий, способствуя росту простейших. Для культивирования в анаэробных условиях требуется вносить массивный инокулюм.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет коричневато-желтый цвет, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,6% вес/об) имеет рН 6,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штамма через 4 дня при 37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)
Рост
Trichomonas vaginalis (30001)
Хороший или обильный

Ссылки:

1. Johnson G. and Trussell R.E., 1943, Proc. Soc. Exp. Biol., 54:245.
2. Mackie and McCartney’s Practical Medical Microbiology, 1989, 13th ed., Vol. 2, Churchill Livingstone, London.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.