Levinthal’s Medium Base Основа среды Левинталя

M472

 

Эту среду с добавлением крови используют для культивирования видов Haemophilus.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	10,00
Мясной экстракт	10,00
Натрия хлорид	5,00
Агар-агар	20,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 45,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в емкости по 100 мл. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить по 5 мл стерильной кроличьей или человеческой крови на каждые 100 мл среды. Подогреть смесь на водяной бане. После оседания частиц асептично разлить в соответствующие стерильные емкости прозрачную надосадочную жидкость.

Принцип и оценка результата:

Этот агар используют для культивирования видов Haemophilus. Гемофильные бактерии нуждаются для роста в присутствии гемоглобина. В цельной кроличьей или человеческой крови содержатся два важные фактора (X и V), необходимые для роста типового вида Haemophilus influenzae (1). Фактор X – термостабильный гемин, производное гемоглобина, фактор V – термолабильный кофермент НАД (никониамидадениндинуклеотид). Источником других питательных веществ, в т.ч. азотистых, служат мясной экстракт и пептический перевар животной ткани. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление среды. Предварительную идентификацию патогенных для человека гемофильных палочек можно проводить по потребности в факторах X и V, а также по гемолитической реакции.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет светло-желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. Нагревание после добавление крови придает среде коричнево-шоколадный цвет, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,5% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Haemophilus influenzae (35056)	Обильный
Staphylococcus aureus (25923)	Обильный
Streptococcus pyogenes (19615)	Обильный

Ссылки:

1. Finegold S.M. and Baron, 1986, Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, 7th ed., The C.V. Mosby Company, St. Louis.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.