Cooke Rose Bengal Agar Агар с бенгальским розовым для грибов

М499

 

Эту среду используют для селективного культивирования и выделения грибов.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Папаиновый перевар соевой муки	5,00
Глюкоза	10,00
Калия дигидрофосфат	1,00
Магния сульфат	0,50
Бенгальский розовый	0,035
Агар-агар	20,00
Конечное значение рН (при 25°С) 6,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 36,54 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для повышения селективности среды добавить в нее хлортетрациклин (до конечной концентрации 35 мкг/мл).

Принцип и оценка результата:

Эта среда разработана Cooke (1). Для выделения грибов из смесей с бактериями предпринимались разные приемы подавления сопутствующей микрофлоры. Waksman (2) описал кислую среду для выделения грибов из почвы. Smith и Dawson (3) использовали бенгальский розовый для подавления бактериальной флоры в среде, которая имела почти нейтральное значение рН и, соответственно, замедляла размножение грибов. Martin (4) использовал бенгальский розовый (1:30 000) в сочетании со стрептомицином (30 мкг/мл) и нашел, что при рН в диапазоне 5,5-6,5 на этой среде подавляется рост широкий круг бактерий, но не грибы. Cooke (1), используя среду Waksman, показал, что сочетание бенгальского розового с хлортетрациклином или окситетрациклином придает среде более выраженные селективные свойства, по сравнению с действием одного красителя или красителя со стрептомицином или хлорамфениколом.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий розовато-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет розово-красную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (3,65% вес/об) имеет рН 6,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 1-4 дня при 25-30°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост	Рост на среде с хлортетрациклином
Candida albicans (10231)	Обильный	Обильный
Saccharomyces cerevisiae (9763)	Обильный	Обильный
Aspergillus niger (16404)	Хороший	Хороший
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	Подавляется
Escherichia coli (25922)	Обильный	Подавляется

Ссылки:

1. Cooke, 1959, Antibiotics and Chemotherapy, 4:657.
2. Waksman, 1922, J. Bact., 7:339.
3. Smith and Dawson, 1944, Soil Sci., 58:467.
4. Martin, 1950, Ibid., 69:215.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2..8°С.