Motility Medium S Полужидкий агар S (с нитратом и желатиной)

M514

 

Эту среду используют для выделения возбудителя холеры и других вибрионов из клинического материала.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Настой говяжьего сердца	500,00
Триптоза	10,00
Желатин	30,00
Натрия хлорид	5,00
Калия гидрохлорид	2,00
Калия нитрат	2,00
Агар-агар	1,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 60,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С и асептично добавить 10 мл 1%-ного раствора трифенилтетразолия хлорида (ТТХ)(FD057). Тщательно перемешать и разлить в стерильные пробирки.

Принцип и оценка результата:

Эта среда предложена Ball и Sellers (1) и позволяет определять подвижность, разжижение желатина и восстановление нитрата.

Настой говяжьего сердца и триптоза обеспечивают присутствие важнейших нутриентов (содержат азот, углерод, серу и др.) для роста бактерий. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление. Агар-агар в концентрации 0,1% в присутствии 3% желатина обеспечивают целостность линии укола после посева. Присутствие нитратредуктазы определяют после учета подвижности (2). Неподвижные микроорганизмы растут по ходу укола, подвижные – дают помутнение среды вокруг линии укола. После восстановления бактериями бесцветного ТТХ образуется нерастворимый в воде формазан, который окрашивает микробный рост в красный цвет.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,1%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируются столбики геля.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (6,0% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Подвижность	Восстановление ТТХ
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	+	+
Escherichia coli (25922)	Обильный	+	+
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный	–	+
Proteus mirabilis (25933)*	Обильный	–	+

Примечания: * - подвижность зависит от температуры (подвижен при 20°С, но может быть неподвижным при 35°С).

Ссылки:

1. Ball R. J. and Seller W., 1966, Appl. Microbiol., 14(4) : 670.
2. MacFaddin J. F., 1985, Media For Isolation-Cultivation-Indentification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.