|
|
Всего посетителей: 3835775
|
|
|
Эти среды с добавлением крови, других субстратов, или без них рекомендуют для выделения, культивирования и культивирования, в первую очередь, бруцелл, а также стрептококков, пневмококков, менингококков и других клинически значимых микроорганизмов. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 41,0 г порошка М538 или М996 или 26,0 г порошка М177 или М997 в 1000 мл дистиллированной воды. При необходимости добавить в бульонные среды агар-агар (до 0,5-1,0%). Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для получения кровяных сред асептично добавить (до 5% об/об) стерильной дефибринированной крови. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри. Принцип и оценка результата:Хеддльсон (1) был первым, кто применил эти среды для выделения бруцелл от человека. Эти среды с добавлением тиамина рекомендованы АРНА (2) и другими официальными документами (3) для выделения бруцелл, а также стрептококков, пневмококков, менингококков и других клинически значимых микроорганизмов. Данные среды готовят без настоя говядины и их рекомендуют для культивирования патогенных и сапрофитных микроорганизмов. Показано (4), что добавление в них глюкозы и тиамина гидрохлорида улучшает рост некоторых видов бруцелл. Глюкоза является источником энергии, триптоза – источником питательных веществ, хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление. Как показал Хеддльсон (1), гемокультуры бруцелл выделяются быстрее, если инфицированную кровь инкубируют в Триптозном бульоне. Для получения кровяного агара к расплавленному и остуженному до 50°С Триптозному агару асептично добавляют (до 5% об/об) стерильную дефибринированную кровь. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета. Плотность готовой среды:Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М538 или М996). Цвет и прозрачность готовой среды:Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. После добавления дефибринированной крови (до 5%, об/об) среда становится вишнево-красного цвета, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель. Кислотность среды:При 25°С водные растворы М538 или М996 (4,1% вес/об) или водный раствор или М997 (2,6% вес/об) имеют рН 7,2 ± 0,2, а водный раствор М177 (2,6% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2 . Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 35-37°С в атмосфере 10% углекислого газа.
Ссылки:1. Huddleson, 1939, Brucellosis In Man and Animals, Oxford Univ. Press, Oxford, U.K. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|