Колумбийский агар для грамположительных кокков

Эта среда используется для селективного выделения «патогенных» грамположительных кокков из клинического и другого материала.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 44,0 г порошка М560 или 39,0 г порошка М560А в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично внести стерильную дефибринированную кровь барана (до 5% об/об). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эту среду готовят по модифицированной прописи колумбийского агара, который разработали Ellner и соавт.(1). Комбинация пептонов обеспечивает быстрый и обильный рост на ней даже прихотливых микроорганизмов. Кроме того, на ней вырастают типичные колонии, лучше проявляется пигментообразование и более четкие гемолитические реакции. Ellner и соавторы нашли, что на этой среде с 5% бараньей крови, 10 мкг/мл колистина и 15 мкг/мл налидиксовой кислоты подавляется рост протеев, клебсиелл и псевдомонад, но не стафилококков, гемолитических стрептококков или энтерококков. Колистин и налидиксовая кислота подавляют рост грамотрицательных бактерий, повреждая их мембрану и нарушая репликацию ДНК, соответственно (2).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М560) или 1%-ному (М560А) агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет желтую окраску, слегка опалесцирует при затвердевании. После добавления к основе стерильной дефибринированной крови (до 5% об/об) среда имеет вишнево-красный цвет и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М560 (4,4% вес/об) или М560А (3,9% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35-37°С.

Ссылки:

1. Ellner et al, 1966, Am. J. Clin. Path., 45:502.
2. Estevez, 1984, Lab. Med., 15:258.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.