Lee’s Agar
Агар Ли для молочнокислых бактерий
M602

 

Эту среду используют для раздельного подсчета Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus в йогуртовых заквасках.

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Гидролизат казеина
10,00
Дрожжевой экстракт
10,00
Лактоза
5,00
Сахароза
5,00
Кальция карбонат
3,00
Калия гидрофосфат
0,50
Бромкрезоловый пурпурный
0,02
Агар-агар
18,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 51,52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно подогреть для полного растворения частиц. Разлить в соответствующие емкости. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 20 мин. Разлить в стерильные чашки Петри слоем толщиной 4-5 мм. Перед розливом осторожно перемешать, чтобы карбонат кальция распределился равномерно.

Принцип и оценка результата:

Эту среду предложили специалисты АРНА (1) для раздельного подсчета гомоферментных Lactobacillus bulgaricus и гетероферментных Streptococcus thermophilus в йогуртовых заквасках. Йогурт производят при контролируемом ферментировании молока закваской из Streptococcus thermophilus и Streptococcus bulgaricus при 43°С. Стрептококки растут первыми, образуя характерный сливочный аромат, обусловленный синтезом диацетила и подобных метаболитов. Кроме того, они снижают окислительно-восстановительный потенциал среды, позволяя размножаться лактобактериям, которые, в свою очередь, продуцируют вещества, стимулирующие рост стрептококков. Типичным является появление резкого запаха ацетальдегида (2).

Гидролизат казеина и дрожжевой экстракт служат источником необходимых для роста йоргуртовых бактерий питательных веществ. Лактоза и сахароза – ферментируемые углеводы. Карбонат кальция, наряду с фосфатом калия, придают буферные свойства среде, препятствуя резкому сдвигу рН в связи образованием молочной кислоты. Бромкрезоловый пурпурный является индикатором рН, который желтеет в кислой среде и окрашивает в желтый цвет соответствующие колонии. Перед использованием питательную среду в чашках рекомендуется подсушить в течение 18-24 ч.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-серый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,8%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет лиловую окраску, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,15% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35 ± 0,2°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Цвет колоний
Lactobacillus bulgaricus (11842)
Обильный
Белые
Streptococcus thermophilus (14486)
Обильный
Желтые

Ссылки:

1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods For the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
2. Davis J.G., Ashton T.F. and MaCaskill M., 1971, Dairy Ind., 36:569.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.