Tergitol-7 Agar
Гептадецилсульфатный агар
М616
Tergitol-7 Agar H
Гептадецилсульфатный сероводородный агар
М850
Tergitol-7 Broth
Гептадецилсульфатный бульон
М851

 

Эти среды рекомендуются в качестве селективных для подсчета колиформных бактерий.
 

 

Рост на гептадецилсульфатном агаре (M616):
Escherichia coli (желтые колонии),
Proteus vulgaris (большие красные колонии)
Pseudomonas aeruginosa (мелкие красные колонии)

 

 

Состав**:

Ингредиенты
М616
грамм/литр
М850
грамм/литр
М851
грамм/литр
Протеозопептон
5,00
5,00
5,00
Дрожжевой экстракт
3,00
3,00
3,00
Лактоза
10,00
10,00
10,00
Натрия гептадецилсульфат
0,10
0,10
0,10
Бромтимоловый синий
0,025
0,025
0,025
Железа аммонийного цитрат
0,50
Натрия тиосульфат
0,50
Агар-агар
15,00
15,00
Конечное значение рН (при 25°С)
6,9 ± 0,2
7,2 ± 0,2
6,9 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 33,13 г порошка М616 или 18,13 г порошка М851 или 34,13 г порошка М850 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. При необходимости остудить среду до 45-50°С и асептично добавить 3 мл 1%-ный раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (ТТХ, FD057).

Принцип и оценка результата:

Эта среда первоначально предложена Чепменом (1) и позже была модифицирована добавлением ТТХ. Эти селективно-дифференциальные среды используют для подсчета колиформных бактерий. Об избирательных бактерицидных свойствах натрия гептадецилсульфата (Тергитола-7) впервые сообщил Pollard (2), после чего этот ингибитор использовали в рутинных анализах воды (3) и для исследования пищевых материалов (4).

Данный агар является модификацией прописи Чепмена (1) для селективного выделения и дифференциации кишечных бактерий из мочи. Тиосульфат натрия является индикатором продукции сероводорода. Натрия гептадецилсульфат (Тергитол-7) подавляет рост грамположительных бактерий и роение протеев, способствуя росту колиформных бактерий. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, образуют желтые колонии с желтыми зонами, тогда как клебсиеллы и энтеробактеры – зеленовато-желтые колонии. Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, образуют голубые колонии. ТТХ восстанавливается бактериальными клетками до нерастворимого формазана, который окрашивает колонии в красный цвет.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М616 или М850).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда окрашена в зеленый цвет, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М616 (3,31% вес/об) или М851 (1,81% вес/об) имеют рН 6,9 ± 0,2, а водный раствор М850 (3,41% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С на средах М616/М851.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Цвет колоний
Enterobacter aerogenes (13048)
Обильный
Желтый
Escherichia coli (25922)
Обильный
Желтый
Salmonella typhimurium (14028)
Обильный
Голубой
Shigella flexneri (12022)
Обильный
Голубой
Staphylococcus aureus (25923)
Подавляется

 

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С на среде М850.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)  Рост Цвет колоний H2S
Escherichia coli (25922)
Обильный
Желтый
-
Proteus mirabilis (25933)
Обильный
Голубой
+
Salmonella enteritidis (13076)
Обильный
Голубой
+
Klebsiella pneumoniae (13883)
Средний
или хороший
Зеленовато-желтый
-
Enterococcus faecalis (29212)
Подавляется
-

Ссылки:

1. Chapman G.H., 1947, J. Bact., 53:504.
2. Pollard A.L., 1946, Science, 103:758.
3. Kulp W., Mascoli C. and Tavshanjian O., 1953, Am. J. Public Health, 43:1111.
4. Mossel D.A.A., 1962, J. Appl. Bact., 25:20.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.