Modified Tergitol 7 Agar Агар с Тергитолом 7, модифицированный

M616I

 

Эту среду используют для селективного выделения и подсчета колиформных бактерий в воде мембранным методом. Она рекомендована также международным комитетом (ISO 9308:1:1990).

 

Рост на гептадецилсульфатном агаре (M616): Escherichia coli (желтые колонии),  Proteus vulgaris (большие красные колонии) Pseudomonas aeruginosa (мелкие красные колонии)

  

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	10,00
Дрожжевой экстракт	6,00
Мясной экстракт	5,00
Лактоза	20,00
Тергитол	0,10
Бромтимоловый синий	0,05
Агар-агар	16,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 57,15 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С и асептично добавить 2,5 мл 1%-ного раствора трифенилтетразолия хлорида (ТТХ)(FD057). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда является селективной и дифференцирующей для подсчета колиформных бактерий в воде. Чепмен (1, 2) изменил первоначальную пропись агара, внеся в его состав ТТХ. Теперь он рекомендован международным комитетом (3).

Тергитол 7 является селективным агентом (4), который подавляет рост грамположительных микроорганизмов и предотвращает роение протеев, способствуя выделению колиформных бактерий. О ферментации лактозы судят по изменению цвета индикатора рН бромтимолового синего. ТТХ позволяет раньше обнаружить и идентифицировать Escherichia coli и Enterobacter aerogenes в воде и пищевых продуктах (5). Колиформные бактерии (кроме Escherichia coli и Enterobacter aerogenes) быстро восстанавливают ТТХ до нерастворимого в воде формазана, который окрашивает их колонии в красный цвет. Колонии ферментирующих лактозу микроорганизмов зеленовато-желтые, а не ферментирующих – красные, окруженные синими зонами.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,6%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет зеленую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,715 вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний*	Цвет колоний**
Escherichia coli (25922)	Обильный	Желтый	Желтый с желтой зоной
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	Желтый	Зеленовато-желтые
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный	Желтый	Зеленовато-желтые
Salmonella typhimurium (14028)	Обильный	Бесцветные	Красные с синей зоной
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Хороший	Бесцветные	Красные с синей зоной
Proteus vulgaris	Хороший	Бесцветные	Красные с синей зоной
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–	–

Примечания:
* - на основной среде
** - на среде с ТТХ

Ссылки:

1. Chapman G.H., 1947, J. Bact., 53:504.
2. Chapman G.H., 1951, Am. J. Public Health, 41:1381.
3. International Organization For Standardization (ISO), 1990, Draft ISO/DIS 9308-1.
4. Pollard A.L., 1946, Science., 103:758.
5. Mossel D.A.A., 1962, J. Appl. Bact., 25:20.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.