Feeley Gorman Agar (F.G. Agar) Агар Фили-Гормана для легионелл	M811
Feeley Gorman Broth (F.G. Broth) Бульон Фили-Гормана для легионелл	M812

 

Эта среда рекомендуется для выделения и предварительной идентификации видов Legionella.

Состав**:

Ингредиенты	М811 грамм/литр	М812 грамм/литр
Гидролизат казеина	17,50	17,50
Мясной экстракт	3,00	3,00
Крахмал	1,50	1,50
L-цистеина гидрохлорид	0,40	0,40
Железа пирофосфат растворимый	0,25	0,25
Агар-агар	17,00	–
Конечное значение рН (при 25°С) 6,9 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 40,0 г порошка М811 или 23,0 г порошка М812 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С и асептично добавить растворенное в воде содержимое флакона со специальной добавкой для легионелл (FD041). Тщательно перемешать и разлить в стерильные пробирки или чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Первоначально эти среды разработали Feeley и соавт. (1), которые использовали неселективную среду обогащения для легионелл

В модифицированной среде крахмал и гидролизат казеина заменены на активированный уголь и дрожжевой экстракт, соответственно, что способствует выделению Legionella pneumophila. Буфер ACES обеспечивает поддержание оптимальных значений рН (3).

Эта среда содержит дрожжевой экстракт, который обеспечивает ее питательными веществами. Гидролизат казеина, мясной экстракт, пирофосфат железа и L-цистеина гидрохлорид стимулируют рост легионелл. Инкубировать посевы рекомендуется в атмосфере, содержащей 2,5% углекислого газа, но в случае превышения этого уровня среда закисляется, что ведет к подавлению роста легионелл. Рекомендуется засевать среду параллельно с Агаром Легионелла (М809) с соответствующими добавками, поскольку первичный рост легионелл на среде Фили-Гормана обычно отсутствует. Выросшие легионеллы можно идентифицировать по характерной для них флюоресценции при облучении ультрафиолетом (2, 3).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,7%-ному агаровому гелю (М811).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М811 (4,0% вес/об) или М812 (2,3% вес/об) имеют рН 6,9 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 4 дня при 35°С в присутствии 2,5% СО₂.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост*	Флюорес ценция (под лучами 366 нм)
Legionella pneumophila (33153)	Хороший или обильный	Ярко-желтая
Legionella bozemanii (33217)	Хороший или обильный	Бело-голубая
Legionella micdadei (33218)	Хороший или обильный	Отсутствует

Ссылки:

1. Feeley J.C., et al, 1978, J. Clin. Microbiol., 8(3): 320.
2. Herbert G.A., et al, 1959, Ann. Intern, Med., 92(1):45.
3. Herbert G.A., et al, 1980, Ann. Intern. Med., 92(1):53.
4. Feeley J.C., et al, 1979, J. Clin. Microbiol., 10(4):437.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С в темноте.