Bacillus cereus Agar Base
Основа агара для Bacillus cereus
М833

 

Эта среда (при внесении специальных добавок) используется в качестве селективной для выделения и подсчета колоний антракоидной палочки.

 

Bacillus Cereus Agar Base (M833) Рост Bacillus cereus

 

 

Состав**:

Ингредиенты
грамм/литр
Пептический перевар животной ткани
1,00
Маннит
10,00
Натрия хлорид
2,00
Магния сульфат
0,10
Натрия гидрофосфат
2,50
Калия дигидрофосфат
0,25
Натрия пируват
10,00
Бромтимоловый синий
0,12
Агар-агар
15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 20,5 г порошка в 475 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить регидратированное содержимое 1 пузырька с полимиксиновой добавкой (FD003) и 25 мл стерильной суспензии яичного желтка (FD045). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Этот агар, разработанный Holbrook и Anderson (1), является специфичной и высокоселективной средой для выделения и подсчета колоний антракоидной палочки в пищевых продуктах. Он позволяет получить рост клеток и прорастание спор Bacillus cereus даже в присутствии большого количества других микробов, контаминирующих пищевой продукт.

Введение в состав среды полимиксина В до концентрации 100 ЕД/мл важно для придания ей селективности, облегчающей выделение Bacillus cereus (2, 3). Если в инокулюме предполагается присутствие плесневых грибов, для их подавления рекомендуется добавить в среду стерилизованный фильтрованием циклогексимид (до 40 мкг/мл). Следует учитывать, что некоторые штаммы Bacillus cereus дают слабую реакцию с желтком. Более того, рост антракоидной палочки на этой среде неотличим от роста Bacillus thuringiensis.

Bacillus cereus вызывают пищевые отравления, связанные с употреблением контаминированного риса (4, 5, 6), инфекции глаз и широкий спектр других клинических состояний (абсцессы, менингиты, септицемию, нагноение ран). Ветеринарам антракоидная палочка известна в качестве причины маститов у овец и телок.

Пептический перевар животной ткани и пируват натрия усиливают образование преципитата из яичного желтка и спорообразование у микроорганизма. Индикатор рН бромтимоловый синий позволяет определить ферментацию маннита.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Первоначально среда имеет зеленую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, а после добавления 5%-ной суспензии желтка становится желтовато-зеленой, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,1% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)
Рост
Цвет колоний
Реакция с желтком
Bacillus cereus (10876)
Хороший
или обильный
Синий
Преципитация
Proteus vulgaris (13315)
Хороший
или обильный
Зеленый
Staphylococcus aureus (25923)
Хороший
или обильный
Желтый
Просветление
Serratia marcescens (8100)
Хороший
или обильный
Красный
Просветление

Ссылки:

1. Holbrook R. and Anderson J., 1980, Can. J. Microbiol., 26(7):753.
2. Donovan K.O., 1958, J. Appl. Bacteriol, 21(1):100.
3. Mossel, D.A.A., Koopman J. and Jongerius E., 1967, J. Appl. Microbiol., 15(3):650.
4. Mortimer P.R. and McCann.G, 1974, Lancet, 104:3.
5. Bouza E., Grant S., Jordan C., et al, 1979, Arch.Ophthalmol., 97:488.
6. Wohlgemuth K., Kirkbride, C.A., Bicknell, E. J. and Ellis, R.P. , 1972, Am. Vet. Med. Ass., 161:1691.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.