Bacillus cereus Agar Base Основа агара для Bacillus cereus

М833

 

Эта среда (при внесении специальных добавок) используется в качестве селективной для выделения и подсчета колоний антракоидной палочки.

Bacillus Cereus Agar Base (M833) Рост Bacillus cereus

 

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	1,00
Маннит	10,00
Натрия хлорид	2,00
Магния сульфат	0,10
Натрия гидрофосфат	2,50
Калия дигидрофосфат	0,25
Натрия пируват	10,00
Бромтимоловый синий	0,12
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 20,5 г порошка в 475 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить регидратированное содержимое 1 пузырька с полимиксиновой добавкой (FD003) и 25 мл стерильной суспензии яичного желтка (FD045). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Этот агар, разработанный Holbrook и Anderson (1), является специфичной и высокоселективной средой для выделения и подсчета колоний антракоидной палочки в пищевых продуктах. Он позволяет получить рост клеток и прорастание спор Bacillus cereus даже в присутствии большого количества других микробов, контаминирующих пищевой продукт.

Введение в состав среды полимиксина В до концентрации 100 ЕД/мл важно для придания ей селективности, облегчающей выделение Bacillus cereus (2, 3). Если в инокулюме предполагается присутствие плесневых грибов, для их подавления рекомендуется добавить в среду стерилизованный фильтрованием циклогексимид (до 40 мкг/мл). Следует учитывать, что некоторые штаммы Bacillus cereus дают слабую реакцию с желтком. Более того, рост антракоидной палочки на этой среде неотличим от роста Bacillus thuringiensis.

Bacillus cereus вызывают пищевые отравления, связанные с употреблением контаминированного риса (4, 5, 6), инфекции глаз и широкий спектр других клинических состояний (абсцессы, менингиты, септицемию, нагноение ран). Ветеринарам антракоидная палочка известна в качестве причины маститов у овец и телок.

Пептический перевар животной ткани и пируват натрия усиливают образование преципитата из яичного желтка и спорообразование у микроорганизма. Индикатор рН бромтимоловый синий позволяет определить ферментацию маннита.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Первоначально среда имеет зеленую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, а после добавления 5%-ной суспензии желтка становится желтовато-зеленой, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,1% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний	Реакция с желтком
Bacillus cereus (10876)	Хороший или обильный	Синий	Преципитация
Proteus vulgaris (13315)	Хороший или обильный	Зеленый	–
Staphylococcus aureus (25923)	Хороший или обильный	Желтый	Просветление
Serratia marcescens (8100)	Хороший или обильный	Красный	Просветление

Ссылки:

1. Holbrook R. and Anderson J., 1980, Can. J. Microbiol., 26(7):753.
2. Donovan K.O., 1958, J. Appl. Bacteriol, 21(1):100.
3. Mossel, D.A.A., Koopman J. and Jongerius E., 1967, J. Appl. Microbiol., 15(3):650.
4. Mortimer P.R. and McCann.G, 1974, Lancet, 104:3.
5. Bouza E., Grant S., Jordan C., et al, 1979, Arch.Ophthalmol., 97:488.
6. Wohlgemuth K., Kirkbride, C.A., Bicknell, E. J. and Ellis, R.P. , 1972, Am. Vet. Med. Ass., 161:1691.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.