Perfringens Agar Base Основа агара для Clostridium perfringens

M837 / M837I

 

Этот агар с селективными и обогащающими добавками используют для предварительной идентификации и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Состав**:

Ингредиенты	М837 грамм/литр	М837I грамм/литр
Триптоза	15,00	15,00
Папаиновый перевар соевой муки	5,00	5,00
Мясной экстракт	5,00	–
Дрожжевой экстракт	5,00	5,00
Натрия гидросульфит	1,00	1,00
Железа аммонийного цитрат	1,00	1,00
Агар-агар	15,00	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 23,5 г порошка М837 в 475 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить 25 мл эмульсии яичного желтка (FD045) и растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD014. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Размешать 21,0 г порошка М837I в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD013/FD014. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда первоначально разработана Harmon и соавт. (1). В дальнейшей модификации (2) он рекомендован специалистами АРНА (3) и международным комитетом (4) для подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Показано, что эта среда наиболее полезна для количественных посевов для выделения Clostridium perfringens, так как на ней подавляется рост почти всех других факультативных анаэробов. Этот агар в чашечном методе подсчета спор Clostridium perfringens превосходит метод определения НВЧ при повышенной температуре (46°С)(5).

Среда содержит триптозу, папаиновый перевар соевой муки, мясной и дрожжевой экстракты, обеспечивающие присутствие азотистых веществ, углерода, серы, витаминов группы В и микроэлементов для роста клостридий. Гидросульфит натрия и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему на восстановление сульфита Clostridium perfringens, которые образуют черные колонии.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует. После добавления FD014 и яичного желтка становится непрозрачной, когда в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М837 (4,7% вес/об) и М837I (4,2% вес/об) имеют рН 7,6 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С в анаэробных условиях.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Восстановление сульфита
Clostridium perfringens (12924)	Обильный	+
Clostridium sordelii (9714)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Harmon S.M., Kauttar D.A. and Peiler J.T., 1971, Appl. Microbiol., 22:688.
2. Hauschild A.H.W. and Hilsheimer R., 1974, Appl. Microbiol., 27 : 78.
3. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
4. International Organization for Standardization (ISO), 1985, Draft ISO/DIS 7937.
5. Harmon S.M. and Kautter D.A., 1987, J. Asso. Off. Anal. Chem., 70 : 994.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.