Yersinia Selective Agar Base Основа селективного агара для иерсиний

М843

 

 

Эта среда рекомендуется для селективного выделения из клинического материала и пищевых продуктов: Yersinia enterocolitica (с добавкой FD034, в соответствии с рекомендациями комитета ISO) или Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis (с добавкой FD208). Для селективного выделения Yersinia pestis (с добавкой FD244) 

Рост Yersinia enterocolitica на селективном агаре для иерсиний (M843) с добавкой FD208

 

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептон специальный	20,00
Дрожжевой экстракт	2,00
Маннит	20,00
Натрия пируват	2,00
Натрия хлорид	1,00
Магния сульфат	0,01
Натрия дезоксихолат	0,50
Нейтральный красный	0,03
Кристаллический фиолетовый	0,001
Агар-агар	12,50
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 58,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить растворенное содержимое 2 пузырьков с селективной добавкой для иерсиний FD034 (для выделения Y. enterocolitica) или содержимое 1 пузырька с селективной добавкой для иерсиний FD208 (для выделения Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis). Для селективного выделения Y.pestis добавить растворенное в воде содержимое 1 фланкона добавки FD244. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Данная среда с селективной добавкой используется для выделения энтеропатогенных иерсиний из клинического и другого материала. Она основана на прописи агара CIN (ЦИН) Schiemann (1, 2) и рекомендована специалистами международного комитета ISO (3). Schiemann (1) модифицировал первоначальную пропись агара ЦИН, заменив в ней смесь желчных кислот на дезоксихолат натрия.
На среде можно отличить бактерии, ферментирующие и не ферментирующие маннит. Ее селективные свойства связаны с присутствием дезоксихолата натрия и кристаллического фиолетового, которые подавляют рост грамположительных и многих грамотрицательных микроорганизмов. Добавление антибиотиков делает ее высоко селективной в отношении иерсиний. Поскольку в состав добавки FD208 не входят беталактамные антибиотики, на среде с ней не подавляется рост Y. pseudotuberculosis, а вырастающие дополнительно некоторые грамотрицательные неферментирующие бактерии не обладают характерной для энтеропатогенных иерсиний морфологией колоний (4). Типичные колонии Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis на данной среде (с добавкой FD034 или FD208) имеют малинового цвета четко отграниченный центр и прозрачный бесцветный край («бычий глаз»). Размер колоний, их гладкость и соотношение размеров центра и края варьируют у разных сероваров. Поскольку колонии Serratia marcescens, Citrobacter freundii и Enterobacter agglomerans могут напоминать колонии энтеропатогенных иерсиний, требуется дальнейшая идентификация, например, в биохимических тестах. С добавкой FD244 формируются типичные по морфологии шероховатые колонии с бугристым центром и кружевной периферией, диаметром не менее 1 мм.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,25%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет оранжево-красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,8% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 дней при 32°С

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Характер роста и колоний на среде M843
	с добавкой FD034		с добавкой FD208
	Рост	Колонии	Рост	Колонии
Yersiniaenterocolitica (27729)	Хороший или обильный	Прозрачные с малиновым «глазком» в центре	Хороший или обильный	Прозрачные с малиновым «глазком» в центре
Yersinia pseudotuberculosis	Подавляется	–	Хороший или обильный	Прозрачные с малиновым «глазком» в центре
Escherichia coli (25922)	Подавляется	–	Подавляется	–
Proteus mirabilis (25933)	Подавляется	–	Подавляется	–
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Хороший или обильный	Непрозрачные крупные желто-зеленые	Хороший или обильный	Непрозрачные крупные желто-зеленые
Stenotrophomonas maltophilia	Подавляется	–	Хороший или обильный	Непрозрачные крупные желто-зеленые
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	–	Подавляется	–

Ссылки:

1. Schiemann, 1979, Can. J. Microbiol., 25 : 1298.
2. Schiemann, 1980, Can. J. Microbiol., 26 : 1232.
3. International Organization For Standardization (ISO), 1994, Draft ISO/DIS 10273.
4. Smirnov I.V., Tsarkov V. V. , Yakushev A. V. A rapid method for the detection of enteropathogenic Yersinia in routine diagnostics of Yersiniosis and Pseudotuberculosis. In: The Genus Yersinia: entering the functional genomic era / Eds. M. Skurnik, J. A. Bengoechea , K. Granfors / Advances in experimental medicine and biology, vol. 529. New York, Kluwer Academic / Plenum Publishers, 2003, p.387-390.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.