|
|
Всего посетителей: 3836577
|
|
|
Основа Тетратионатного бульона Мюллера-Кауфмана
Бульон используют для эффективного обогащения и выделения сальмонелл. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 82,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Охладить и непосредственно перед употреблением асептично добавить 19 мл раствора йода (20,0 г йода и 25,0 г калия йодида в 100 мл стерильной дистиллированной воды) и 9,5 мл 0,1%-ого раствора бриллиантовой зелени. Перед розливом в стерильные пробирки тщательно перемешать для равномерного распределения частиц карбоната кальция. Принцип и оценка результата:Этот бульон первоначально был разработан Мюллером (1), а затем модифицирован Кауфманом (2, 3) и рекомендован специалистами АРНА (4) для обогащения и выделения сальмонелл. Кауфман предложил ввести бриллиантовый зеленый и препарат желчи (Ox bile) для подавления роста комменсалов и более эффективного выделения сальмонелл. Бриллиантовый зеленый добавляют после нагревания среды, так как оно снижает его селективные свойства. Для подавления роста протеев (5) можно добавить в среду 4 мг/л антибиотика новобиоцина. Гидролизат казеина и папаиновый перевар соевой муки содержат важнейшие питательные вещества для роста бактерий. Примерно 10,0 г исследуемого образца вносят в 100 мл бульона, тщательно встряхивают и помещают флакон в водяную баню при 45°С на 15 минут. Затем флаконы переставляют в термостат или водяную баню при 43°С. Через 18-24 и 48 часов инкубирования делают высевы на модифицированный агар с бриллиантовым зеленым (М016). Данная среда не подходит для роста Salmonella typhi, Salmonella pullorum и некоторых других сальмонелл. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий кремовый порошок. Цвет и прозрачность готовой среды:При добавлении бриллиантового зеленого и раствора йода среда становится светло-зеленой, опалесцирует, имеет выраженный белый преципитат. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 43°С.
Ссылки:1. Mueller L., 1923, C.R. Soc. Biol. (Paris), 89:434. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить не рекомендуется.
|