Anaerobic Egg Agar Base Основа анаэробного желточного агара

M902

 

 

Анаэробный агар с добавлением куриного желтка используют для определения Clostridium perfringens в пищевых продуктах. 

Рост Clostridium perfringens на анаэробном желточном агаре (M902)

 

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Протеозопептон	20,00
Гидролизат казеина	5,00
Дрожжевой экстракт	5,00
Натрия хлорид	5,00
Агар-агар	20,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 55,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до температуры около 50°С, асептично добавить 80 мл эмульсии куриного желтка (Egg Yolk Emulsion, FD045). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Анаэробный агар с добавлением куриного желтка рекомендуется специалистами АРНА (1) для определения Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Среда для выделения и первичной дифференциации видов Clostridium разработана McClung и Toabe (2).

Гидролизат казеина, дрожжевой экстракт и пептон служат источниками аминокислот и других азотистых питательных веществ, дрожжевой экстракт – витаминов группы В. Эмульсию желтка добавляют в среду для выявления протеолитической, липазной и лецитиназной активности микроорганизмов. В результате разрушения лецитина желтка микробными лецитиназами в среде выпадает нерастворимый преципитат (3). Липазы микробов расщепляют жиры, входящие в состав желтка, что сопровождается появлением радужного блеска на поверхности колоний. Для выявление этого признака может потребоваться инкубирование чашек в течение недели (3). О протеолитической активности микробов можно судить по появлению зоны просветления среды вокруг колоний (4).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды прозрачна или слегка опалесцирует, после добавления желточной эмульсии формируется желтый непрозрачный гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (5,5% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 37°С в анаэробных условиях.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Лецитиназа	Липаза
Clostridium perfringens (12924)	Хороший или обильный	+	–
Clostridium sporogenes (11437)	Хороший или обильный	–	+

Ссылки:

1. Vanderzant C. and Splittstoesser D.F. (Eds.), 1992, Compendium of Methods For The Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
2. McClung and Toabe, 1947, J. Bact., 53:139.
3. Finegold and Baron, 1986, Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, 7th ed., The C.V. Mosby Company, St. Louis.
4. Allen, 1985, In Manual of Clinical Microbiology, 4th ed., Lennette, Balows, Hausler and Shadomy (Eds.), ASM, Washington, D.C.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.