Motility Test Medium (Edwards and Ewing)
Полужидкий агар (по Эдвардсу и Юингу)
M930

 

Эту среду используют для определения подвижности энтеробактерий.

Состав**:

Ингредиенты

грамм/литр

Пептический перевар животной ткани

10,00

Мясной экстракт

3,00

Натрия хлорид

5,00

Агар-агар

4,00

Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 22,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить по 8 мл в пробирки для тестирования. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в вертикальном положении.

Принцип и оценка результата:

Эту среду готовят в соответствии с прописью, предложенной Эдвардсом и Юингом (1). В полужидком (0,4-07%) агаре неподвижные микроорганизмы растут по ходу укола, а подвижные дают диффузный рост.

Пробирки засевают уколом, используя бактериологическую иглу из проволоки. О подвижности культуры свидетельствует диффузный рост в среде. Для облегчения учета в среду можно добавить 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид (ТТХ)(FD057). Соли тетразолия бесцветны, но в результате редуцирующего влияния бактерий они превращаются в нерастворимый формазан, имеющий красный цвет, что помогает отметить границы роста. Вместе с тем, подвижность Listeria monocytogenes лучше всего определять на среде без ТТХ.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,4%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, прозрачна, если в пробирках формируется столбик геля.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2,2% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)

Рост

Подвижность

Escherichia coli (25922)

Обильный

+

Enterobacter aerogenes (13048)

Обильный

+

Salmonella enteritidis (13076)

Обильный

+

Klebsiella pneumoniae (13883)

Обильный

Staphylococcus aureus (25923)

Обильный

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.