HiMedia: инструкция по применению продукции По всем вопросам обращаться: Почтовый адрес: 124498, Москва, а/я 130. Офис: 123007, Москва, Хорошевское шоссе, д. 13 а, кор.3. Тел/Факс: +7 (495) 940 33 12, 940 33 13, 940 33 14,940 33 96, 940 33 97, 940 33 98. E-mail: himedia@himedialabs.ru Наш сайт: www.himedialabs.ru
Antibiotic Assay Medium No.11 (Neomycin, Erythromycin Assay Agar) Среда для испытания антибиотика № 11 Продукция зарегистрирована в Министерстве здравоохранения Российской Федерации (ФСЗ 2009/03707).		Кат. № M004

Применение:

Агар для испытания антибиотиков

Состав**:	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	6,00
Панкреатический гидролизат казеина	4,00
Дрожжевой экстракт	3,00
Глюкоза	1,00
Агар-агар	15,00

Конечное значение рН (при 25ºС) 8,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 30,50 грамм порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Остудить до 45-50ºС. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Примечание: Рекомендуется для микробиологического тестирования эритромицина, Хлортетрациклин, дигидрострептомицина сульфат, эритомицина эстолат, фрамицитин, гентамицин, гентамицина сульфат, канамицина сульфат, канамицина моносульфат, нетилмицина сульфат, нетилмицин, неомицин, паромомицин, сисомицин, спирамицин, стрептомицина сульфат.

Другие испытания:

метод пластинчатых разведений выполнен с использованием B. pumilis / канамицин и M. flaves / эритомицин

1) Разведение: 16 мг канамицина в 10 мл дистиллированной воды

Рабочий раствор: 1:10 разбавление вышеупомянутого раствора

концентращия	рабочий раствор мл	дистиллированная вода мл	зона ингибирования
5	0,25	4,75	22мм
20	1,00	4,50	32мм
100	5,00	-	41мм

2) Разбавление:

9 мг эритомицина на 10 мл дистиллированной воды

Рабочий раствор: 1:10 разбавление вышеупомянутого раствора

концентращия	рабочий раствор мл	дистиллированная вода мл	зона ингибирования
5	0,25	4,75	22мм
10	0,50	4,50	32мм
100	5,00	-	41мм

Принцип и оценка результата:

Среда для Испытания Антибиотиков используется для проверки эффективности антивиотиков. Grove и Randall описали свои исследования и среду в их всестороннем трактате об исследовании антибиотиков (1). Schmidt и Moyer сообщили об использовании жидкой среды, используемой при исследовании антибиотиков (2). Эту среде рекомендует USP (3) и FDA (4).

Питательные вещества и факторы роста обеспечивают такие ингредиенты как пептический перевар животных тканей, ферментативный гидролизат казеина, дрожжевой экстракт и мясной экстракт. Декстроза - источник углерода и энергии. Агар обеспечивает превосходные условия для диффузии антибиотиков и дает четко определенные зоны задержки роста. Более высокий pH обеспечивает оптимальные условия для активности антибиотиков, а также благоприятствует росту испытуемых микроорганизмов.

Длч проведения антибиотических испытаний необходимо использовать свежеприготовленную среду. Испытуемые микроорганизмы инокулируются в стерильный предварительно охлажденный до 40-45°C посевной агар, и равномерно распределяются по поверхности затвердевшего основного агара. При проведении микробиологических испытаний все условия необходимо собюдать максимально тщательно.

Контроль качества

Внешний вид порошка:

Кремово-желтый гомогенный сыпучий порошок

Консистенция готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

В чашках Петри светло-желтый гель, прозрачный, с легкой опалесценцией.

Кислотность среды:

При 25°C водный раствор (3,05% вес/об) имеет рН 8.3±0.2

pH готовой среды: 8.10-8.50

Культуральные свойства:

Культуральные свойства референс-штаммов при   35-37°C через 18-24ч.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	инокулюм (КОЕ)	рост	выросло колоний	испытание антибиотиков
Micrococcus luteus 9341	50-100	обильный	>=70%	эритомицин при опробировании тилозина, тилозина тартрата, ванкомицина гидрохлорида, при pН 8.0±.0.2
Staphylococcus aureus 6538p	50-100	обильный	>=70%	канамицина моносульфат, канамицина сульфат, нетилмицина сульфат
Staphylococcus epidermidis 12228	50-100	обильный	>=70%	гентамицин, неомицин, нетилмицин, паромомицин, сисомицин
Bacillus pumilis 14884	50-100	обильный	>=70%	хлортетрациклин, фрамицитин, канамицина сульфат
Bacillus subtilis 6633	50-100	обильный	>=70%	дигидрострептомицина сульфат, эритомицина эстолат, канамицина моносульфат, канамицина сульфат, спирамицин, стрептомицина сульфат
Bacillus subtilis NCTC 8236	50-100	обильный	>=70%	стрептомицина сульфат дигидрострептомицина сульфата
Bacillus subtilis NCTC8241	50-100	обильный	>=70%	эритомицина эстолат, гентамицина сульфат
Интерпретация рост культуры как обильный, хороший, слабый, скудный или отсутствие роста, выраженный в % выросших колоний по отношение к количеству засеянных микроорганизмов: Рост культуры (посевная доза 10 2-10 3 КОЕ/мл):   % от засеянных Обильный: >70 %; Хороший: > 40 % но <70 %; Плохой: > 20 % но <40 %; Скудный – слабый: > 10 % но <20%; Скудный: > 10 %; Нет роста: нет видимых колоний

Условия и сроки хранения:

Сохранять при температуре ниже +30ºС в плотно закрытом контейнере. Применять только свежеприготовленную среду. Использовать до даты, указанной на этикетке.

Источники литературы:

1. Grove and Randall, 1955, Assay Methods of Antibiotics Medical Encyclopedia, Inc, New York.

2. Schmidt and Moyer, 1944; J. Bact, 47:199.

3. United States Pharmacopoeia 2009, US Pharmacopoeial Convention Inc, Rockville, MD

4. Tests and Methods of Assay of Antibiotics and Antibiotic containing Drugs, FDA, CFR, 1983. Title 21, part 436, Subpart D, Washington, D.C. U.S Government printing office, paragraphs 436, 100-436, 106 pg 242-259 (April 1)