Fluid Tetrathionate Medium without Iodine and BG
Жидкая тетратионатная среда (без иода и бриллиантового зеленого)
М032

 

Эту среду с добавлением иода и бриллиантового зеленого рекомендуют для селективного обогащения с целью выделения сальмонелл из фекалий, мочи, пищевых продуктов и другого материала в ходе санитарно-микробиологических исследований.

Состав**:

Ингредиенты

грамм /литр

Гидролизат казеина

2,50

Пептический перевар животной ткани

2,50

Желчные соли

1,00

Кальция карбонат

10,00

Натрия тиосульфат

30,00

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 46,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Остудить ниже 45°С и добавить 20 мл иодного раствора (6,0 г иода и 5,0 г иодида калия на 20 мл дистиллированной воды) и 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зеленого. Тщательно перемешать и разлить по 10 мл в пробирки.

Готовую среду желательно использовать в тот же день. В противном случае надо простерилизовать основу среды и хранить ее некоторое время. Не нагревайте среду после добавления иода. После его добавления среду надо использовать немедленно.

Принцип и оценка результата:

Тетратионатный бульон впервые был описан Mueller (1), который нашел, что такая среда селективна по отношению к возбудителям кишечных инфекций и подавляет рост колиформ. В качестве обогатительной среды для сальмонелл она теперь рекомендована многими национальными и международными официальными документами (2, 3, 4, 5). Избирательные свойства среды зависят от комбинации тиосульфата и тетратионата, которая подавляет комменсальные колиформы (6, 7). Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата. Для дальнейшего подтверждения материал со среды обогащения засевают штрихами на чашки Агара с бриллиантовым зеленым (М016), Агаром МакКонки (М081), Висмут-сульфитным агаром (М027).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок кремового цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда после добавления бриллиантового зеленого и иода имеет светло-зеленую окраску, опалесцирует и имеет обильный белый преципитат.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 37°С на тетратионатном бульоне с последующим субкультивированием на агаре МакКонки (М081).

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Выделение
Цвет колоний
Escherichia coli (25922)
Отсутствует
или мало
Белые или розовые
с преципитатом
Salmonella choleraesuis (12011)
Хорошее
или отличное
Бесцветные
Salmonella typhi (6539)
Хорошее
или отличное
Бесцветные
Salmonella typhimurium (14028)
Хорошее
или отличное
Бесцветные 

Ссылки:

1. Mueller, 1923, Compt. Rend. Sco. Biol., 89:434.
2. U.S. Food and Drug Administration, 1984, Bacteriological Analytical Manual, 6th ed., AOAC, Arlington, Va.
3. The United States Pharmacopoeia, 2002, USP 25/NF 20, Asian Edition, US Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
4. Speck M. (Ed.), 1984, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed., APHA, Washington, D.C.
5. Greenberg A. E., Clesceri L. S. and Eaton A. D. (Eds.), 1998, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th ed., APHA, Inc., Washington, D.C.
6. Pollock M.R. and Knor R., 1943, Biochem J., 37:476.
7. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria., Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.